虫草多糖的分离纯化及结构鉴定-中国药师.pdfVIP

中国药师　　２０１５年第１８卷第３期　　ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｉｓｔ２０１５，Ｖｏｌ．１８　Ｎｏ．３ 虫草多糖的分离纯化及结构鉴定 １ １ ２ 李蓉 　孙书娟 　江晓路 　（１．青岛市妇女儿童医院　青岛２６６０３４；２．中国海洋大学食品科学与工程学院） 摘　要　目的：分离纯化冬虫夏草菌发酵液多糖，并对虫草多糖的结构进行分析。方法：采用液体发酵法培养冬虫夏草菌， 水提醇沉法提取虫草发酵液多糖ＥＰＳ和菌丝体多糖ＩＰＳ，联合使用葡聚糖凝胶柱色谱对虫草多糖进行分离纯化，采用凝胶过 滤法测定其纯度和相对分子质量，气相色谱法分析其单糖组成，再通过硫酸咔唑法分析糖醛酸含量。结果：经分离纯化得到 多糖ＥＰＳ的相对分子质量（Ｍｒ）为７８ｋＤａ，多糖含量为９４．８％，单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖，摩尔比为４．５∶８．０∶１．０；糖 醛酸含量为６．０％。多糖ＩＰＳ的Ｍｒ为４２ｋＤａ，多糖含量为９２．５％，单糖组成为甘露糖、葡萄糖、半乳糖，摩尔比为２．８∶３．０∶１．０； 糖醛酸含量为４．５％。结论：虫草多糖ＥＰＳ和ＩＰＳ均是杂多糖。 关键词　 冬虫夏草菌；多糖；分离；纯化；结构分析 中图分类号：Ｒ２８４．１　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００８０４９Ｘ（２０１５）０３０４０７０４ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＣｏｒｄｙｃｅｐｓＳｉｎｅｎｓｉｓ １ １ ２ ＬｉＲｏｎｇ，ＳｕｎＳｈｕｊｕａｎ，ＪｉａｎｇＸｉａｏｌｕ（１．ＱｉｎｇｄａｏＷｏｍｅｎａｎｄＣｈｉｌｄｒｅｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｈａｎｄｏｎｇＱｉｎｇｄａｏ２６６０３４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅｏｆ ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｓｏｌａｔｅａｎｄｐｕｒｉｆｙｔｈｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＣｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓ，ａｎｄａｎａｌｙｚｅｉｔｓｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ： Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓｗａｓｃｕｌｔｕｒｅｄｂｙａｌｉｑｕｉｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ａｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄａｌｃｏｈｏｌｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｅｘ ｔｒａｃｔｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＣｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｌｉｑｕｏｒ（ＥＰＳ）ａｎｄｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＣｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓｍｙｃｅｌｉｕｍ（ＩＰＳ）． Ｓｅｐｈａｄｅｘｇｅｌｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｉｓｏｌａｔｅａｎｄｐｕｒｉｆｙｔｈｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．Ｔｈｅｐｕｒｉｔｙａｎｄｒｅｌａｔｉｖｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｏｆｔｈｅｐｏｌｙ ｓａｃｃｈａｒｉｄｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙａｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．ＴｈｅｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙＧＣ． Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｓｕｌｆｕｒｉｃａｃｉｄｃａｒｂａｚｏｌｅｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔｏｆＥＰＳｗａｓ７８ｋＤａ．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅａｎｄｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｗａｓ９４．８％ ａｎｄ６．０％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＥＰＳｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆ ｍａｎｎｏｓｅ，ｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｇａｌａｃｔｏｓｅｗｉｔｈｔｈｅｍｏｌａｒｒａｔｉｏｏｆ４．５∶８．０∶１．０．ＴｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｏｆＩＰＳｗａｓ４２ｋＤａ．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｏｌｙｓａｃ ｃｈａｒｉｄｅａｎｄｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｗａｓ９２．５％ａｎｄ４．５％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＩＰＳｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆｍａｎｎｏｓｅ，ｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｇａｌａｃｔｏｓｅｗｉｔｈｔｈｅｍｏｌａｒｒａｔｉｏ ｏｆ２．８∶３．０∶１．０．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＢｏｔｈｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅＥＰＳａｎｄＩＰＳｉｎＣｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓａｒｅｈｅｔｅｒｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． ＫＥＹＷＯＲＤＳ　Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓ；Ｐｏｌｙｓａｃｃｈ