IRF1对M1巨噬细胞极化及其抗肿瘤效应的影响.pdfVIP

2017年 2月 基础医学与临床 February2017 第37卷 第2期 Basic ClinicalMedicine V01．37 No．2 文章编号：1001-6325(2017)02—0189-08 研 究 论 文 IRF1对 M1巨噬细胞极化及其抗肿瘤效应的影响 谢昌利，刘翠颖，林 艳，吴碧涛，王 秦，李紫微，涂植光 (重庆医科大学检验医学院 临床检验诊断学教育部重点试验室，重庆 400016) 摘要：目的研究IRF1对M1巨噬细胞极化及M1介导的抗肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建单核细胞U937来源 M1巨噬细胞模型(U937一M1)，将细胞分为4组：用PMA诱导的未活化巨噬细胞组(M0)，用PMA，IFN一^y和LPS处理的Ml 型巨噬细胞组(M1)，用 siRNA干扰 IRFI的M1型巨噬细胞组(silRF1)以及阴性干扰的Ml型巨噬细胞组 (sic)。用流式 细胞术检测MI／M2特异表面标志物CD86／CD206的表达；qPCR检测M1／M2相关基因(儿 12p35，IL-129／40，IL-23p19，IL-6， 孙rF_ 儿 10)及IFNB1的表达；ELISA检测IL-12p70，IL-10及IFN-B的表达；Westernblot检测IRF1及 IRF5的表达； CCK8和流式细胞术分别检测HepG2及SMMC一7721增殖和凋亡。结果 与U937．M1组相比，干扰z 的M1组CD86表达 降低，但CD206升高(Po．05)；mRNA水平上，IL-12p35，IL．12t,40，ZL-23p19， 6，TNF-ot以及IFNB1表达降低，但儿10表 达增高(尸QO1)；蛋白水平上，IL-12p70，IFN—B及IRF5表达降低，但 IL10表达增高(Pn05)。IRF1干扰后，M1巨噬 细胞促进肝癌细胞增殖、抑制其凋亡(PQ05)。结论 干扰IRFI后，M1巨噬细胞极化状态受损，甚至部分向M2型转 变；其抗肿瘤效应转变为促肿瘤效应；且IRF1可能参与调节IFN—B与IRF5的表达。 关键词：IRF1；M1极化；抗肿瘤；IRF5 中图分类号 ：R73 文献标志码：A EffectsofIRF1onpolarizationandantitumorfunctionofM1microphage XIEChang—li，LIUCui-ying，LINYan，wUBit·ao，WANGQin，LIZi—wei，TuZhi—guang (KeylaboratoryofLaboratoryMedicalDiagnosticsofEducationMinistry，CollegeofLaboratoryMedicine，ChongqingMedicalUniversity Chongqing400016，China) Abstract：Objective TostudyifIRF1couldregulatethepolarizationbyIRF1andM1statusandaffectM1media— tedantitumorfunction．Methods U937derivedM1macrophage(U937一M1)modelwasestablished．Thecells werederidedinto4groups：thePMApretreatedunpolarizedmacrophage(M0)，thePMA，IFN一^yandLPSinduced M1macrophage(M1)，thesiRNAofIRF1knockeddownM1macrophage(siIRF1)andthenegativecontrolsiR— NAtreatedM1macrophage(siC)．Furthermore，theexpressionofCD86andCD206wasdetec