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本诊断规程于2016 年8 月由标准委代表植检委通过。
本附件是 ISPM 27 号标准规定的一部分。
ISPM 27 号标准
限定有害生物诊断规程
DP 13 :梨火疫病菌(Erwinia amylovora )
2016 年通过;2016 年出台
目录
1. 有害生物信息3
2. 分类信息3
3. 检测4
3.1 显症植物的检测4
3.1.1 症状4
3.1.2 取样与样品制备5
3.1.3 分离5
从显症样品中分离5
富集分离7
3.1.4 血清学检测7
富集- DASI-ELISA 7
直接组织印迹-ELISA 8
免疫荧光 8
侧向层析免疫检测9
3.1.5 分子检测9
分子检测的对照9
DNA 提取 10
通过PCR 进行DNA 扩增 11
关于PCR 的一般考虑 13
实时PCR 13
PCR 结果的解释 15
环介导等温扩增 15
3.2 对无症状植物的检测 16
3.2.1 取样和样品制备 16
3.2.2 筛选试验 17
4. 鉴定 17
4.1 营养学与酶学鉴定 18
4.1.1 生物化学特征 19
国际植物保护公约 DP 13-1
DP 13 限定有害生物诊断规程
营养学与酶学图谱 19
自动化鉴定20
脂肪酸分析20
4.2 血清学鉴定20
4.2.1 凝集反应20
4.2.2 免疫荧光20
4.2.3 ELISA 20
4.2.4 侧向层析免疫21
4.3 分子鉴定21
4.3.1 PCR 21
4.3.2 巨限和脉冲场凝胶电泳21
4.4 致病性技术21
5. 记录22
6. 获取进一步信息的联络点22
7. 致谢23
8. 参考文献23
9. 图27
DP 13-2 国际植物保护公约
限定有害生物诊断规程 DP 13
1. 有害生物信息
梨火疫病菌(Erwinia amylovora )是火疫病的致病因子,该病害可危害蔷薇科
(Rosaceae )苹果亚科(Maloideae )(绣线菊亚科(Spiraeoideae ))多数种类的
植物。它是第一个被报道的细菌类植物
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