海藻糖酶基因rna干扰载体对花烟草的转化-中国农学通报.pdfVIP

中国农学通报 2014,30(15):282-285 Chinese Agricultural Science Bulletin 海藻糖酶基因RNA干扰载体对花烟草的转化 1 2 2 1 2 2 王 彬 ，周 靖 ，赵文博 ，余 佳 ，陈 茁 ，郭 蓓 1 2 （北京农学院植物科学技术学院，北京102206；北京农学院生物科学与工程学院，北京102206） 摘 要：为了能够使花烟草更好地应用于园林美化，需要进一步提高其抵抗非生物胁迫的能力。海藻糖在 植物抗逆性方面具有重要作用。利用RNA 干扰技术抑制植物海藻糖酶基因的表达，可以阻断海藻糖降 解过程，从而使植物体内海藻糖含量增加，有望以此提高植物抵抗非生物胁迫的能力。本实验利用叶盘 侵染法将带有拟南芥海藻糖酶基因干扰载体(iTre- 1285)的农杆菌导入花烟草中，经过抗生素筛选初步获 得阳性植株后，对阳性植株提取DNA ，完成了目的基因的PCR 鉴定，初步证明目的基因已转入花烟草植 株中。通过本试验，在建立起花烟草基因转化方法的同时，成功地将海藻糖酶干扰基因转入花烟草中。 转基因花烟草植株的获得为后期能够进一步筛选出具有抵抗非生物胁迫的转基因植株奠定了基础。 关键词：花烟草；海藻糖酶；RNA 干扰；基因转化 中图分类号：Q78 文献标志码：A 论文编号：2014-0105 TransformationofNicotianaalatawithRNAiVectorofTrehalaseGene 1 2 2 1 2 2 WangBin,ZhouJing,ZhaoWenbo,YuJia,ChenZhuo,GuoBei 1 (PlantScienceandTechnologyCollege,BeijingUniversityofAgriculture,Beijing102206; 2CollegeofBiologicalScienceandEngineering,BeijingUniversityofAgriculture,Beijing102206) Abstract:Inordertomakebetteruseofflowertobaccoinlandscaping,itsabilitytoresistabioticstressneedto befurtherenhanced.Trehaloseplaysanimportantroleinplantresistance.UsingRNAinterferencetoinhibit theexpressionoftrehalasegenecanblocktheprocessoftrehalosedegradation,soastoincreasethetrehalose contentinplant,whichcanbeexpectedtoimproveplantresistancetoabioticstress.Inthisexperiment, agrobacterium carried the RNA interference vector of Arabidopsis trehalase gene (iTre- 1285) had been transformedintoflowertobacco(Nicotianaalata)byleafdiscinfectionmethod;positiveplantswereacquired afterscreeningwithkanamycinandca