烟草ntggpps4基因的克隆和功能初步分析-烟草科技.pdfVIP

2017 年 1 月 烟草科技 Jan. 2017 第50 卷第 1 期 Tobacco Science Technology Vol. 50 No. 1 烟草NtGGPPS4 基因的克隆和功能初步分析 1 2 3 1 1 4 1 1 *1 李 锋 ，孟利军 ，史艳梅 ，郑庆霞 ，刘萍萍 ，魏春阳 ，王 燃 ，杨 军 ，罗朝鹏 1. 中国烟草总公司郑州烟草研究院，郑州高新技术产业开发区枫杨街2 号 450001 2. 河南农业大学食品科学技术学院，郑州市文化路95 号 450002 3. 河南中医药大学科技处，郑州市金水路1 号 450008 4. 中国烟草总公司职工进修学院，郑州市鑫苑路7 号 450008 摘要：为明确烟草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因NtGGPPS4 的功能，从普通烟草中克隆到该基因， 构建了超量表达载体pCAMBIA 1300-NtGGPPS4 ，并通过农杆菌介导法转化烟草。进一步测定了转基因 烟株中西柏烷二萜醇和质体色素的含量。结果表明：共鉴定出4 株NtGGPPS4 表达量明显升高的转基因 植株，且转基因植株中α- 西柏三烯二醇（α-cembrenediol, α-CBD ）和β- 西柏三烯二醇（β-cembrenediol, β-CBD ），以及新黄质、紫黄质、叶黄素、叶绿素a 、叶绿素b 和β- 胡萝卜素等6 种质体色素含量都有显著 提高。表明NtGGPPS4 参与了烟草西柏烷二萜醇和类胡萝卜素的生物合成。 关键词：烟草；牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因；超量表达；功能分析 中图分类号：TS413 文献标志码：A 文章编号：1002-0861 （2017 ）01-0001-05 CloningandfunctionalanalysisofNtGGPPS4fromNicotianatabacum 1 2 3 1 1 4 1 LI Feng , MENG Lijun , SHI Yanmei , ZHENG Qingxia , LIU Pingping , WEI Chunyang , WANG Ran , 1 * 1 YANG Jun , LUO Zhaopeng 1. Zhengzhou Tobacco Research Institute of CNTC, Zhengzhou 450001, China 2. Institute of Food Science and Technology, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China 3. Science and Technology Department, Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450008, China 4. Staff Development Institute of CNTC, Zhengzhou 450008, China Abstract: To clarify the function of geranylgeranyl pyrophosphate synthase gene (NtGGPPS4) in tobacco, the coding sequence of NtGGPPS4 gene was cloned from Nicotiana tabacum . The over-expression vector pCAMBIA 1300-NtGGPPS4 was constructed and transferred