焦磷酸测序技术对阿司匹林个体化用药相关snp位点分型.pdfVIP

学 报 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１７，４８（５）：５７７－５８２ ５７７ 焦磷酸测序技术对阿司匹林个体化用药相关ＳＮＰ位点分型 １，２ １ ３ ３ １ ３ 邢晓清 ，卜修民 ，初亚男 ，邹秉杰 ，宋沁馨 ，周国华 １ ２ （中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室，南京２１０００９；河北省人民医院药学部， ３ 石家庄０５００５１；南京军区南京总医院药理科，南京２１０００２） 摘　要　阿司匹林的抗血小板作用在临床存在显著的个体差异，而ｒｓ５９１８、ｒｒｓ７３００１２３个单核苷酸多态性位点与 阿司匹林的药效和不良反应有着密切的联系。本文基于ＰＣＲ结合焦磷酸测序技术，建立了阿司匹林相关ＳＮＰ位点的基因分 型方法。自主设计扩增引物和测序引物；优化ＰＣＲ扩增条件，使３个位点能够在相同的条件下扩增并通过梯度稀释基因组 ＤＮＡ检测方法的灵敏度；最后，分别基于本文建立的新方法和Ｓａｎｇｅｒ测序技术对２０例临床样本进行３个位点的基因分型，验 证该方法的准确性。结果显示，本文成功建立了阿司匹林个体化用药相关ＳＮＰ位点的基因分型方法，检测下限低至０４ｎｇ基 因组ＤＮＡ，用两种方法对２０例临床样本进行３个位点的基因分型，结果完全一致，说明该方法有较高的准确性。 关键词　阿司匹林；焦磷酸测序技术；单核苷酸多态性；个体化用药 中图分类号　Ｑ８１９　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１７）０５－０５７７－０６ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ 引用本文　邢晓清，卜修民，初亚男，等焦磷酸测序技术对阿司匹林个体化用药相关ＳＮＰ位点分型［Ｊ］．中国药科大学学报，２０１７，４８ （５）：５７７－５８２ Ｃｉｔｅｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅａｓ：ＸＩＮＧＸｉａｏｑｉｎｇ，ＢＵＸｉｕｍｉｎ，ＣＨＵＹａｎａｎ，ｅｔａｌＧｅｎｏｔｙｐｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒＳＮＰｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄａｓｐｉｒｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｂａｓｅｄｏｎ ｐｙｒｏｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．ＪＣｈｉｎａＰｈａｒｍＵｎｉｖ，２０１７，４８（５）：５７７－５８２ ＧｅｎｏｔｙｐｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒＳＮＰｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄａｓｐｉｒｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｂａｓｅｄ ｏｎｐｙｒｏｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １牞２ １ ３ ３ １ ３ ＸＩＮＧＸｉａｏｑｉｎｇ 牞ＢＵＸｉｕｍｉｎ牞ＣＨＵＹａｎａｎ牞ＺＯＵＢｉｎｇｊｉｅ牞ＳＯＮＧＱｉｎｘｉｎ 牞ＺＨＯＵＧｕｏｈｕａ １ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤｒｕｇＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｖｉｇｉｌａｎｃｅｏｆＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ ２ ３ ２１０００９牷ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ牞ＨｅｂｅｉＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ牞Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００５１牷ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ牞ＮａｎｊｉｎｇＧｅｎｅｒａｌＨｏｓ ｐｉｔａｌ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００２牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｈｅｒｅａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅａｎｔｉｐｌａｔｅｌｅｔｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｓｐｉｒｉｎ．Ｔｈｒｅｅｓｉｎｇｌ