畜禽养殖场附近污水中多粘菌素e耐药性肠杆菌的分离-生态环境学报.pdfVIP

生态环境学报 2017, 26(4): 671-675 Ecology and Environmental Sciences E-mail: editor@ 畜禽养殖场附近污水中多粘菌素 E 耐药性肠杆菌的分离分析 及 内源质粒检测 1 2 1 2 1 2* 钟传青 ，宗工理 ，张超 ，付加芳 ，姜天翼 ，曹广祥 1. 山东建筑大学市政与环境工程学院，山东 济南 250101 ；2. 山东省医学科学院山东省医药生物技术研究中心，山东 济南 250062 摘要：畜禽养殖业大量使用抗生素引起了广泛的微生物耐药性问题，研究抗生素耐药菌株可以了解环境中细菌的耐药性 情况和抗性基因的传播机制。采集畜禽养殖场周边的污水，分析了污水中多粘菌素E 耐药性细菌和耐药性肠杆菌的丰度； 同时以一株具有较高多粘菌素E 耐药水平的肠杆菌R11 为例，首先进行 16S rDNA 测序和抗生素耐药谱分析，然后通过 质粒提取、酶切电泳以及脉冲场凝胶电泳 （PFGE ），分析其内源性质粒等情况。结果表明：在畜禽养殖场周边污水环境 中，多粘菌素E 耐药性细菌占细菌总数的0.14%~0.35% ，多粘菌素E 耐药性肠杆菌占肠杆菌总数的1.50%~7.40% ，而肠 杆菌占细菌总数的 1.13%~2.45% ，说明肠杆菌可能是携带多粘菌素 E 抗性基因的主要细菌种类，同时也是养殖业污水中 细菌的主要组成部分。16S rDNA 序列分析确定R11 是一株Enterobacter cloacae ，抗生素耐药谱分析R11 具有多重耐药性， 除对林可霉素敏感外，阿米卡星、四环素和环丙沙星的最小抑菌浓度（MICs ）为 10 μg∙mL- 1 ，阿莫西林的MICs 为25 μg∙mL- 1 ， 磺胺甲恶唑的MICs 为32 μg∙mL- 1 ，氨苄西林的MICs 为40 μg∙mL-1 ，链霉素的MICs 为90 μg∙mL- 1 ，而多粘菌素E 的MICs 最高，达到96 μg∙mL-1。质粒提取酶切和PFGE 分离鉴定结果显示，R11 菌株可能有多个内源性质粒。综上所述，R11 菌 株具有较高水平的多粘菌素E 耐药性，并且具有多重耐药性和多个内源性质粒，对于研究多粘菌素E 耐药性机制具有一 定的参考价值。 关键词 ：畜禽养殖场；肠杆菌；多粘菌素E ；多重耐药性；质粒 DOI: 10.16258/ki.1674-5906.2017.04.018 中图分类号：X171.5 文献标志码：A 文章编号：1674-5906 （2017 ）04-0671-05 引用格式：钟传青, 宗工理, 张超, 付加芳, 姜天翼, 曹广祥. 2017. 畜禽养殖场附近污水中多粘菌素E 耐药性肠杆菌的分离 分析及内源质粒检测[J]. 生态环境学报, 26(4): 671-675. ZHONG Chuanqing, ZONG Gongli, ZHANG Chao, FU Jiafang, JIANG Tianyi, CAO Guangxiang. 2017. Isolation and characterization of the polymyxin E resistant enterobacteria from sewage water near livestock and poultry feedlot [J]. Ecology and Environmental Sciences, 26(4): 671-675. 微生物的抗生素耐药性已成为影响病原菌治 宏兵等，2015 ），说明抗生素耐药性已经发展成为 疗效果的重要问题，严重危及公众健康。抗生素耐 无法忽视和回避的问题。 药性微生物普遍存在于非人类活动的自然环境中， 肠杆菌科 （Enterobacteriaceae ）细菌是一类与 具有古老的起源 （李显志，2013 ），但是人类活动 人类