一个典型中国a一地中海贫血家系的基因分析-新医学.pdfVIP

遗 传 学 报， 12(6):478--485,1985 Acts Genetica $inica 一个典型中国a一地中海贫血家系的基因分析 张俊武 吴冠芸 （中国医学科学院基础医学研究所，北京） 黄有文 王荣新 张尼佳 （中国人民解放军303医院，广西南宁） 本文应用印迹杂交技术和。一珠蛋白基因探针，对临床上发现的一个 HbH病人DNA进行 了限制性内切酶图谱分析，确定其为 。一地贫 1与右侧缺失 。一地贫2双重杂合子 （。一／一)）o 对其家系的另11个成员进行了a一珠蛋白基因分析，证明他们均为 。一地贫基因携带者。其中 先证者的父亲及一个女儿的基因型与先证者相同，母亲、妻子、两个弟弟及长子为 “一地贫I杂 合子 。（“／一），两个妹妹及二子、三子均为右侧缺失 。一地贫2杂合子 （“一／一）。 家系的基 因分析对采取各种途径控制 。一地贫的传延具有重要意义。 a一地中海贫血 （以下简称 a一地贫）在世界上不少地区及我国南部地区具有相当高的 发生率1【1，类型和临床症状也很不同u]0临床上只有两种最严重的a一地贫容易诊断。一 是 Barts胎儿水肿综合症 一（／一），表现为死胎；二是血红蛋白 H（b.)H病，在进行血红 蛋白电泳检查时往往发现快速泳动的HbH 印。）带，一些HbH病人的临床症状及血象 变化也较严重。。一地贫2杂合子 -（alaa)．及a一地贫1杂合子．一（l／a司，由于其贫血体 征不明显，血象变化也相当轻微，临床上往往难以发现或确诊。本文对临床上发现的一例 HbH病患者进行了限制性内切酶图谱分析，并通过对其家系的基因型分析检测出更多的 a一地贫患者或 。一地贫基因携带者。 材 料 和 方 法 临床上的一些检查及血红蛋白电泳参照郁知非幻〔介绍的方法进行。抽取受检者静脉 血5--10毫升，按文献E3)的方法制备高分子量 DNA，省略 RNaseA酶解及以后的步骤。 正常人DNA仍按文献 4［]的方法从胎盘中提取。 含基因组重组质粒 PRBal(，的菌株系美国加州技术研究所Maniatis赠送，用碱变 性法(io，结合轻基磷灰石法(6，制备质粒 DNA，用Bs户31(Psri)（中科院生化所东风试剂厂） 酶解质粒产生的1.5kb片段用 WhatmanDE-81纸法回收纯化71〔，再用缺口翻译法进行32P 标记3]［0 每次 18z1gDNA用适当的限制性内切酶 (BRL）降解后，用0.8务琼脂枯迸行水平 板电泳分离，转移到硝酸纤维膜上，和 23P标记的a一珠蛋白基因探针杂交和放射 自显 影I3J0 本文于1984年10月巧 日收到。 ‘期 张俊武等：一个典型中国 “一地中海贫血家系的基因分析 479 结 果 与 讨 论 先证者梁XX，男，45岁，汉族，广西桂平县人，有贫血史，贫血貌，肝肋下1厘米，脾 未及，IIb9克外，RBC451万／MM3，网织红细胞3.6 ，包含体实验＋十。 血红蛋白电 泳检查HbA21.6外，HbF0.5务，HbH9.1%，临床诊断为HbH病。 我们分别用6组限制性内切酶降解了先证者的 DNA，并用 a一珠蛋白基因探针进行 了印迹杂交。 从图1(A）可看出，正常人 DNA用 BarsHI酶解时得到13.9kba-基因特异的片段， 而先证者得到10.0kba一基因特异的片段，短了3.9kbo 图1正常人 N（）及梁XX (H)DNA。一基因特异的限制酶片段杂交自显影 所用的酶在图下指出，片段长度以HindIII酶解的 .DNA为标准定出。(A),(B),(C),(D) 为4次不同实验的结果0 Fig.IAutoradiographsshowa-globingene-specificrestrictionfragmentsofDNAobtained from LiangXX (