巴西橡胶树heveabrasiliensis微管相关蛋白全-热带亚热带植物学报.pdfVIP

热带亚热带植物学报 2005，13(6)：480—484 JournalofTropicalandSubtropcialBotany 巴西橡胶树 (Heveabrasiliensis)微管相关蛋白 全长 cDNA克隆及表达分析 邓柳红 ，肖苏生 ，罗明武2，张春发 (1．中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物国家重点实验室，海口571101 2．华南热带农业大学，海南儋州571737) 摘要：从巴西橡胶树Heveabr~iliensis差减cDNA文库中分离到微管相关蛋白(Microtubule-associatedprotein，MAPs) 基因片段，根据该基因片段序列信息，设计特异引物，采用 cDNA末端快速扩增技术RACE(RapidAmplificationof cDNAEnds)进行差异片段的5’和 3’端的扩增，获得了长度为788bp的全长cDNA，该基因在GenBank中的登录号 为AY461412。序列分析表明该基因包含完整的开放阅读框，编码 144个氨基酸，与微管相关蛋白基因家族具有很高 的同源性，推测该基因是微管相关蛋白基因。半定量RT．PCR检测证实它在胶乳中的表达强于叶中，胁迫处理(伤害及 乙烯处理1使其表达上调。 关键词：巴西橡胶树；微管相关蛋白；cDNA末端快速扩增技术；RT．PCR 中图分类号：Q785 文献标识码：A 文章编号：1005—3395(2005)06—0480—05 Cloningand IdentificationofacDNA EncodingPutative M icrotubule．associatedProteinsfrom Heveabrasiliensis DENG Liu—hong，XIA0 Su—sheng，LU0 Ming—WU，ZHANG Chun。fa (1．StateKeyLaboratoryofTropicalCropBiotechnologyChineseAcademyofTropicalAgriculturdSciences，Haikou571101，China； 2．SouthChinaUniversityofTropicalAgriculture，Danzhou，571737，China) Abstract：Thecellskeletonoflaticiferouscellmightplayaveryimportantroleinlatexproductionandlatexflow， andinwoundhealingandlaticiferblockingoftappedHeveabrasiliensis． Inordertounderstandtherelationship betweencellskeletonoflaticiferouscellsandlatexexploitationandlaticiferblocking， acloneR329wasisolated rfom thesubtracted cDNA library ofHevea brasiliensis，which showed high homologywith microtubule— associatedproteins．ThecompletecDNA ofR329wasobtainedbyusing3’一and5’RACEstrategies．Itwas788bp longcontainingan435bpORF，flankedbya173bp5’一UTRanda179bp5’一UTRincludingapoly(A1tailof 28bp． TheDNA sequenceofR329 isavailablefrom theGenBankdatabasesundertheaccessionnumber AY461412．ThertanscriptsofR329 wereobserved by RT—PCR，no signalwasdetected in leavesofHevea brasiliensis，whereassing ificantsin