皮肤角质形成细胞中TRPVl受体激活后的蛋白质组差异分析.pdfVIP

药学实践杂志 2013年9月25日第31卷第 5期 JournalofPharmaceuticalPractice，Vo1．31。No．5，September25，2013 · 论著 · 皮肤角质形成细胞中TRPV1受体激活后的蛋 白质组差异分析 黄 瑾，王 建，袁 芳，胡文娟 (上海市浦东新区人民医院药剂科，上海 201200) [摘要] 目的 研究皮肤角质形成细胞 中辣椒素受体 TRPV1激活后细胞 中蛋 白质组学 的变化 ，并鉴定差异蛋 白质 。方 法 皮肤角质形成细胞株 HaCaT细胞经辣椒素 (CAP)刺激24h后 ，提取蛋 白样 品，采用双向凝胶 电泳技术分离 HaCaT细胞 总蛋 白，用 PDQuest软件分析对照组和 CAP刺激组蛋 白组 图谱 的表达差异点，再运用串联飞行时间质谱 (MALDI—TOF—MS)鉴 定差异蛋 白。结果 CAP刺激 HaCaT细胞后 ，磷酸甘油醛异构酶 、烯醇化酶 、6一磷酸葡萄糖酸 内酯酶和组织蛋 白酶 D蛋 白表 达水平增高，角蛋 白14和60S酸性核糖体蛋 白P2表达量 降低 ，这些蛋 白可能在 TRPV1激活后影响细胞功能的过程 中有重要 作用 。结论 利用蛋 白质组学技术 ，研究皮肤角质形成细胞株 HaCaT细胞中TRPV1受体激活后蛋 白表达差异，为研究TR— PV1受体的作用机制 ，以及为研发针对性药物，提供新的线索和方 向。 [关键词] 皮肤角质形成细胞 ；辣椒素受体 ；双 向电泳 ；蛋 白质组学 [中图分类号] R318．5 [文献标志码] A [文章编号] [DOI] 10．3969／j．issn．1006一O1l1．2013．05．004 Differentialproteom icsanalysisofhuman keratinocyteswith transientreceptor potentialvanilloid-1activated bycapsaicin HUANGJin，WANG Jian，YUAN Fang，HU Wen—juan(DepartmentPharmacy， 201200，China) [Abstract] 0bjective Toevaluatethedifferentialproteomicsofhumankeratinocyteswithtransientreceptorpotentialva— nilloid-1(TRPV1)activatedbycapsaicin．Methods Humankeratinocyteswerecuhuredandtreatedbycapsaicin．Two—dimensional polyacrylamidegelelectrophoresis(2D—PAGE)combinedwithMALDI-TOF／TOFidentificationwereusedtoinvestigatetheeffectof TRPV1activationontheproteomeofkeratinocytes．Results Comparedwithblankcontrol，triosephosphateisomerase(TPI)，enolase 1，6-phosphogluc0nolactonase，cathepsinD hadhigherexpressioninperitonealmacrophagesofexperimentalendometriosis，whilekera— tin 14 and60SacidicribosomalproteinP2 expressedlower．Conclusion Itwasrevealedthattherewasapotentialmechanism ofTR— PV1activationinkeratinocytes，whichgaveanew sighttofind targetsand screen drugsin skindisorders． [Keywords] transientreceptorpotentialvanilloid一1；humankeratinocytes；capsaicin；two—dimensionalpolyaerylamidegelelec— trophoresis 辣椒素受体 TRPV1(transientreceptorpotential 泛存在于非神经细胞上 ’ ，例