血管紧张素II血管紧张素II.doc

血管紧张素II [药盒组成、试剂配制及贮存条件] 1.AII标准品 7瓶,冻干品 2. 125I-AII(125I血管紧张素II) 1瓶,冻干品(红色) 3AII抗体 1瓶,冻干品(兰色,免抗) 4温育液 1瓶。 5分离试剂 1瓶，悬浮液。 6.EDTA(抗凝剂)1瓶 7.酶抑制剂 2瓶 [操作步骤] 待试剂充分溶解，即按下表顺序加样及操作。 AII放免分析操作程序表 单位：ul 试剂 管别 T管 非特异管（NSB） 标准管 待测管 温育液 200 AII标准 100 待测血浆 100 125I-AII 100 100 100 100 AII抗体 100 100 充分摇匀，2-8。C温育15小时以上 分离试剂 500 500 500 充分摇匀，室温放置15分钟后，3500转/分离心20分钟，弃上清液，测各管放射性计数60秒。 [结果计算] 非特异结合率（NSB/T%）= NSB管（CPM）-本底（CPM） *100% T管（CPM）-本底（CPM） 零管结合率（B。/T%）= 零标准管（CPM）-NSB管（CPM） *100% T管（CPM）-本底（CPM） B/B。%= 标准管或样品管（CPM）-NSB管（CPM） *100% 零标准管（CPM）-NSB管（CPM） 以标准品浓度为横座标，B/B。为纵座标，在半对数纸上绘制标准曲线，根据血浆样品的B/B。从标准曲线上查得血浆样品中AII的含量。也可根据仪器程序自动计算出血浆样品AII的含量，建议最好使用四参数方法处理。 [技术指标] 1灵敏度 15Pg/ml 2精密度 批内变异系数10% 批间变异系数15% 3非特异结合率5% 4零管结合率(B。/T)30% 5标准曲线ED25:511pg/ml；ED50:151pg/ml；ED75:44.8pg/ml（供参考），相对系数绝对值0.9900. [血浆样品采集和保存] 1 待病人脉搏稳定后，坐姿采集肘静脉血2ml，迅速注入在冰水浴中冷却的含20ulEDTA的试管中，摇匀，放冰水浴中冷却后以1000转/分离心5分钟（最好在4。C离心），分离血浆。取血浆1ml放入另一管已预冷的含有10ul酶抑制剂1和20ul酶抑制剂2的试管中摇匀，立即测定或置-20。C冰箱保存，可保留二周。 2 激发试验，病人在基础状态采血后，给肌肉注射速尿（0.7mg/kg）。总剂量不超过50mg，保持立位，不饮水，2小时后坐姿采血。 注意：注射速尿后两小时内随尿排出的水电解质较多，如病人血钾过低，采血前应适当给予补充。试验过程中病人可能出现口渴、无力、出汗等，一般不重，如过重，应酌情终止试验。让病人平卧，并给予糖盐茶水。 3 B-阻断剂，血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平，一般在停药后二周测PRA。利血平等代谢慢的药物应在停药后三周测定。不适停药的病人应改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。 4 钠摄入量影响机体PRA水平，病人测定PRA三天前应适当减少食盐摄入量。 病人应测定取血前24小时的尿钠含量，以供分析PRA结果时参考。 [测定原理] 本药盒采用竞争性放射免疫分析方法测定人血浆中AII的含量，待测血浆、标准品中的AII和125I-AII与有限量的抗体竞争结合，125I-AII一部分与抗体结合为复合物，另一部分游离。加入分离试剂，离心使复合物部分沉淀与游离部分分离，弃去上清液，测定沉淀物的放射性计数，待测血浆和标准中的AII含量与复合物的放射性强度呈负相关，用一系列不同浓度的AII做标准，可获得标准曲线，从标准曲线上可查出血浆中AII含量。 [临床意义] 本药盒用于测定人血浆中血管紧张素II（AII）的含量。肾素是由肾脏近球体细胞产生的分子量为40000的一种羧基蛋白水解酶。它作用于血管紧张素原产生血管紧张素I（AI，10肽）。AI在转化酶的作用下形成血管紧张素II（AII，8肽）。 肾素-血管紧张素系统有多种生理功能。在调节人体血压、水和电解质平衡代谢过程中起着重要作用。另外，它与一些肾脏疾病及与肾脏有关的一些疾病有密切关系。如肾素瘤、肾动脉狭窄、Bartte,s综合症，Liddle综合症等。 血浆肾素活性（PRA）和AII浓度的测定已成为原发性和继发性高血压分型诊断、治疗及研究的重要指标。对一些有关肾脏疾病的辅助诊断、治疗以及发病机理的探讨有着重要意义。血浆中加入酶抑制剂来抑制转化酶和血管紧张素酶的活性，AI、AII不再进一步降解，使测定结果准确。 临床常见病PRA和AII浓度变化情况 1 增高 原发性高血压肾素型 Bartte,s综合症 恶性高血压