细胞工程 动物染色体工程.pptVIP

染色体变异 染色体数变异 一种是体细胞内以染色体组为基数进行的整倍性变化，这产生的变异导致多倍体或单倍体； 另一种是染色体组内的个别染色体数目有所增减，使细胞内的染色体数目不是基数的的完整倍数，因此被称为非整倍体。 染色体变异 染色体结构变异 染色体易位：一个染色体上某一区段与另一非同源染色体上的区段发生互换。 染色体缺失：染色体的某一区段及其带有的基因一起丢失 染色体倒位：染色体上某一区段连同它带有的基因顺序发生180度倒转。 染色体复制：一个染色体上增加了相同的某个区段。 什么是染色体工程？ 定义：是指人们按照预先的设计，消减、添加或替换同种或异种动物细胞染色体的技术。 Rich和Khush于1966年最先提出这一概念。 第一节 动物多倍体诱导 多倍体（polyploid）Winkler(1916年)首先使用的，它是指体细胞中含有三个或更多染色体组的个体。 在高等植物中相当多，但动物中却少得多。60年代发现一种美洲角蛙是四倍体动物，之后陆续在低等脊椎动物中发现许多多倍体动物。银鲫 由于多倍体动物生长速度快，成活率高及抗病能力强等特点，所以人工诱导多倍体、改善动物经济性状倍受重视。 鱼类和贝类都是重要的水产养殖动物，多为体外产卵、体外受精和体外发育，因而人工诱导多倍体的研究在鱼类和贝类已取得很大进展。 (二) 人工诱导多倍体的方法 1、生物学方法 主要采用杂交方法，尤其是种间杂交的方法。 雌性草鱼2n=48与雄性三角鲂2n=48杂交获得子一代染色体数目为72的草鲂杂种三倍体，其中草鱼提供了二倍数目的染色体48，三角鲂提供了单倍数目的染色体24。 为什么种间杂交会导致草鱼第二极体不排出，从而导致多倍体产生？ 2、物理学方法 ⑴ 温度休克法 冷休克法0-5℃热休克法30℃左右 必须要优化的三个因素：处理时刻（即处理开始时间，一般从受精开始算起）、处理持续时间和处理温度。 一般说来，冷水性鱼类采用热休克，而温水性鱼类如鲤科和鲷科鱼类采用冷休克效果好。 2、物理学方法 ⑵ 静水压法 较高的水静压650 kg/cm2，诱导率高90-100%，时间短3~5 min，损伤小，成活率高。 需要专门设备如水压机，成本高；样品室容量有限，不适于大规模生产。 ⑶ 高盐高碱法高pH值或高盐的条件，尚待完善。 3、化学方法 秋水仙碱(colchicine)：可以抑制细胞分裂中纺缍丝的形成，因而抑制有丝分裂。 细胞松弛素(cytochalasin B)：能抑制肌动蛋白聚合成微丝，从而抑制细胞质分裂。 聚乙二醇(polyethylene glycol) 其他如麻醉剂(N2O和CHClF2) 药品有毒性，且多嵌合体，很少被使用。 （三）多倍体倍性鉴定 原因：所处理的受精卵不能百分之百地成为多倍体，且常表现为嵌合体。 直接方法：染色体计数和DNA含量测定等。 间接方法：核体积测量法(细胞核大小与染色体数目成正比)、蛋白质电泳、生化分析和形态学检查等。 染色体计数：准确、直接的方法。 DNA含量测定：流式细胞仪。 核体积测量：二倍体/三倍体核体积之比为1:1.5，二倍体与四倍体的核体积之比为1:1.74。 蛋白质电泳： 生化分析：如在关东系银鲫中，三倍体红血球的丙酮酸激酶的含量含著高于二倍体。 （四）多倍体动物的应用前景 多倍体动物的生活力及生长能力。 许多诱导的多倍体动物如两栖类、鱼类、贝类等都具有良好的生存力和生长率。 诱导三倍体可以增加种间杂种的成活率，三倍体种间杂种可以比二倍体杂种成活得更好一些。 三倍体的优势 三倍体性腺不育：不需要消耗能量用于性腺的发育，避免了繁殖季节的肉质下降、生长停滞和死亡率增高，缩短了养殖周期，降低了养殖成本。 利用三倍体的不育性来控制养殖密度，防止品种混杂和退化。 三倍体的缺点 三倍体的高度不育不利于种质保存，每次都需重新诱导。 培育四倍体，性成熟后与二倍体杂交，获得不育的三倍体种苗，是当前的热门课题。 多倍体动物的其它经济性状 三倍体虹鳟的鱼肉质量确实优于二倍体，其抗传染性造血器官坏死病毒能力较强； 三倍体大西洋鲑耐低氧，故可适用于低氧环境养殖； 三倍体香鱼对声音和光线的感受能力比二倍体香鱼略显迟钝，适于在噪音较大的环境中放养。 第二节 雌、雄核发育和性别控制 意义：产生单性种群，在纯系建立、性别控制、遗传机制研究等方面具有重要的理论和实际意义。 （一）雌核发育(Gynogenesis)定义 俗称假受精，指精子虽然正常地进入卵内，激动卵子，但其细胞核并未参与胚胎发育，而是很快消失，胚胎发育仅在母体遗传的控制下进行，因而雌核发育个体完全表现母本性状，其基因型也与母本相同。 雌核发育不同于孤雌生殖 它需要同种或异种精子进入卵子，来启动胚胎发育。 同型雌性配子，