小麦根质膜微囊的制备及水分胁迫对452转运活性的影响-核农学报.pdfVIP

78 核 农 学 报 　1998 ,12 (2) :78～82 　 A cta A g ricult u rae N ucleatae S i nica 小麦根质膜微囊的制备及水分胁迫 45 2 + 对 Ca 转运活性的影响 吕金印　高俊凤 　曹翠玲 ( 西北农业大学同位素室 　 基础科学系 　杨陵　7 12 100) 利用蔗糖密度梯度离心法制备小麦根质膜微囊 ,研究结果表明:郑引 1 号小麦根 质膜 H + A TPase 潜在活性为 24 % , 内翻外型质膜囊泡 占76 % 。- 10M Pa P E G 胁 迫处理 24h ,两种定向的小麦根质膜 Ca2 + A TPase 活性均增加 ,正常水分条件下和 P E G 胁迫处理后 ,E GTA 对该酶活性抑制率分别为 62 %和 53 % , 内翻外型质膜微囊 45 2 + 对放射性核素 Ca 的转运量分别为 22 09nmol/ mg p ro 和 4 17nmol/ mg p ro , P E G 45 2 + 胁迫处理后 ,小麦根质膜微囊 Ca 转运量下降了 81 % 。 关键词 :小麦 　水分胁迫 　质膜 　钙转运 前 言 ( ) 质膜 PM 是细胞中物质交流的一个通透性屏障 ,也是细胞与外界环境进行信息交流的媒 介[ 1 ,2 ] 。自Hodges 等首先利用蔗糖密度梯度离心法纯化燕麦根细胞质膜后 ,对高等植物细胞 质膜的研究受到人们的重视[3 ,4 ] 。由于对质膜结构 、功能与活性研究的侧重点不同 ,而采用的 ( ) 质膜微囊定向不同 ,所用的分离制备方法也不尽相同。内翻外型质膜微囊 PMIOV 可用于 物质转运研究 ,它避免了细胞内其它物质与代谢的相互影响 ,简化了研究对象[5 ,6 ] 。 钙不仅是植物矿质营养的大量元素 ,而且是植物生长发育和代谢的调控者[7～9 ] 。若细胞 质中钙浓度过高 ,将会同磷酸反应生成沉淀而影响以磷为基础的能量代谢[9 ] 。作为主动 Ca2 + 2 + ( ) 转运系统之一的 PMCa A TPase 钙泵 ,在主动排除细胞质中过量钙过程中起着重要的作 用[6 ,10 ] 。前人在这方面做了一定工作[6 ,11 ,12 ] ,但关于逆境条件下质膜钙转运的报道甚少 。本 研究采用蔗糖密度梯度离心法制备质膜微囊 ,结合放射性核素示踪技术 ,对小麦根 PM H+ A TPase 潜在活性和水分胁迫下 PMCa2 + A TPase 与跨膜 Ca2 + 转运活性的变化进行了探讨 。 材 料 与 方 法 ( ) 材料与处理 　以对水分敏感的冬小麦 T rit icu m aes t iv u m L . 郑引 1 号为材料 ,种子经 02 %HgCl2 消毒 10min 后 , 自来水冲洗数次 ,培养 16～20h ,露白后播于尼龙网上 ,在 25 ±1 ℃