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雪莲培养物对乙醇急性肝损伤小鼠抗氧化作用 　　摘要：以乙醇急性肝损伤小鼠为实验模型，探讨雪莲培养物的抗氧化作用。以低、中、高三个剂量（16.7mg/kg.d、33.3mg/kg.d和100mg/kg.d）的雪莲培养物饲喂小鼠30天后，以50%乙醇造急性肝损伤模型，眼眶取血，测血清中超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧物酶（Glutathione Peroxidase， GSH-Px）和丙二醛（Malondialdehyde，MDA）的水平。结果显示，雪莲培养物各剂量组血清中SOD和GSH-Px均明显高于模型对照组，血清中的 MDA 与模型组相比有显著降低；并且高剂量即100mg/kg.d的雪莲培养物与阳性对照（维生素C 56mg/kg.d）的SOD、 GSH-Px和MDA水平相当。表明雪莲培养物对乙醇急性肝损伤小鼠具有显著的抗氧化作用。 关键词：雪莲培养物；小鼠；急性肝损伤；抗氧化作用 天山雪莲（Saussurea involucrata Kar.et KiL）系菊科风毛菊属植物，主产于新疆天山和昆仑山，生长在雪线以上，民间以全草入药，具有活血通经、散寒除湿、强筋助阳等功效，用于治疗风湿性关节炎、肺寒咳嗽、闭经、胎衣不下、阳痿等疾患，是维吾尔族的传统药物[1，2]。雪莲培养物是运用植物细胞培养技术，在人工可控的培养条件下，使雪莲细胞获得最佳的生存环境和充足的营养，同时经过上千次的筛选、检测、鉴定、培养、再筛选，获得的优质、高产细胞产品，其与野生的天山雪莲具有相似的化学成分[3～6]。本文通过研究服用天山雪莲培养物后乙醇急性肝损伤小鼠的超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase， SOD）、谷胱甘肽过氧物酶（Glutathione Peroxidase， GSH-Px）和丙二醛（Malondialdehyde， MDA）的变化，来探讨雪莲培养物的抗氧化作用。 1 材料与方法 1.1 实验样品：雪莲培养物，由大连普瑞康生物技术有限公司惠赠。 1.2 实验动物：昆明系小鼠，由吉林大学实验动物中心提供。 1.3 剂量选择： 按推荐剂量0.2g/人/d（3.34mg/kg.bw）的5倍、10倍和30倍设计实验剂量，即低、中、高剂量组分别为16.7mg/kg.d、33.3mg/kg.d和100mg/kg.d。 1.4 仪器与试剂 1.4.1 主要仪器： 酶标仪，RF-540荧光分光光度计，精密天平（精度：0.00001g），低温离心机。 1.4.2 试剂 无水乙醇，购自北京通广精细化工有限公司，以无菌水配制得50%乙醇；SOD、GSH—Px和MDA测定试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。 1.5 实验方法 小鼠经口给予雪莲培养物，每天1次，共30天。之后一次性灌服50%乙醇，造成急性肝损伤，眼眶静脉取血，测定血清中SOD、GSH-Px、MDA。雪莲培养设三个剂量组：高剂量组（100mg/kg.d）、雪莲培养物中剂量组 （33.3mg/kg.d）和雪莲培养物低剂量组（16.7mg/kg.d）。另设空白对照组、模型对照组和阳性对照组其中，空白对照组为每天用蒸馏水灌胃，不予造模；模型对照组为每天用蒸馏水灌胃，之后一次性灌服50%乙醇造模；阳性对照组为以维生素C 56mg/kg.d灌胃，之后造模。每组动物数量为12 只。 2.结果 各组小鼠眼眶静脉取血，测定血清中SOD、GSH-Px、MDA。实验结果如图1所示。 从图中可以看出，与空白对照组相比，模型对照组的SOD和GSH-Px的水平明显降低，丙二醛浓度明显升高，说明造模成功；雪莲培养物各剂量组血清中SOD和GSH-Px均明显高于模型对照组，血清中的 MDA 与模型组相比有显著降低。 说明雪莲培养物具有很好的抗氧化作用；并且，高剂量组即100mg/kg.d雪莲培养物与维生素C阳性对照组的抗氧化效果相当。 从图中还可以看出，在实验剂量范围即16.7～100mg/kg.d内，雪莲培养物各剂量组间具有明显的量效关系，雪莲培养物剂量越大，抗氧化效果越好。 3 讨论 人体自身氧化反应以及环境中有毒化学物质不断产生着自由基。自由基具有强氧化性，可损害机体的组织和细胞，进而引起慢性疾病如癌症、心脏病和帕金森、阿尔茨默等；除此以外，自由基还会引起机体的衰老效应。人体自身虽然具有抗氧化系统，但并不足以将自由基完全消除。因此，有必要补充外源的抗氧化物质来维持人体的氧化平衡。 多酚类化合物是重要的抗氧化物质。对雪莲培养物进行全成分分析结果显示，雪莲培养物中含有丰富的多酚类化合物，它们是槲皮素、木犀草苷、槲皮苷、异槲皮苷、芹菜素、绿原酸及