川芎—香附不同配比提取物中主要成分含量变化探究.docVIP

川芎—香附不同配比提取物中主要成分含量变化探究 　　[摘要] 目的 比较川芎-香附不同配比提取产物藁本内酯、阿魏酸和α-香附酮含量变化，为药对的药效学和药物代谢动力学研究提供依据。 方法 分别测定川芎、香附药材及1∶2、1∶1、2∶1比例的川芎-香附药对提取液中指标成分的含量，确定不同比例川芎-香附药对提取液中有效成分与其药对比例变化的相关性。 结果 川芎-香附药对比例为1∶1时，香附中α-香附酮的溶出度明显增大；川芎-香附药对比例为2∶1时，川芎中藁本内酯溶出度显著增加。 结论 不同配比的川芎-香附药对在提取过程中有效成分溶出度不同。 [关键词] 川芎-香附；配比；成分含量 [中图分类号] R284.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）07（a）-0121-03 川芎-香附配伍，主要用于治疗郁证，具有良好的疏肝解郁、行气调经、活血止痛的功效[1-2]。两者配伍也应用于很多复方中，但是两者的配伍比例在临床应用中不尽相同。为了阐明两者针对同证不同病的配伍机制，本文选择川芎的主要药效物质藁本内酯和阿魏酸以及香附的主要药效物质α-香附酮作为测定指标，初步考察两者不同配比提取物中的含量变化，为后续的药效学和药物代谢动力学研究提供依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent 1200高效液相色谱仪（G1322A真空脱气机，G1311A四元泵，G1329A自动进样器，G1314B自动进样器），电子天平（德国Sartorius CP2250），旋转蒸发仪（上海申顺生物科技有限公司Senco R-201），多功能粉碎机（永康帅通工具有限公司ST-04A）。 1.2 试药 藁本内酯对照品，批号2871；阿魏酸对照品，批号：110773-200611（中国食品药品检定研究所）；α-香附酮对照品，批号：110748-201111（中国食品药品检定研究所）；白米醋（佛山海天食品调味有限公司）；川芎、香附（西安市中药饮片厂）。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 ODS-3 C18色谱柱（4.6 mm×250 mm）；C18保护柱（4.6 mm×10 mm），流动相流速为l mL/min。测定藁本内酯的流动相为甲醇-0.05%磷酸水（36∶64），检测波长为320 nm；测定阿魏酸的流动相为甲醇-0.05%磷酸水（75∶25），检测波长为320 nm；测定 α-香附酮的流动相为甲醇-水（70∶30），检测波长为250 nm。 2.2 专属性 取适当浓度对照品及样品分别于相应的色谱条件下进样分析，藁本内酯、阿魏酸和α-香附酮与样品中其他成分分离良好，保留时间分别为10.7、22.5、14.0 min。见图1。 2.3 对照品溶液的制备 分别精密称取藁本内酯对照品5 mg，阿魏酸对照品2.16 mg，α-香附酮对照品13.60 mg，分别置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，低温避光存贮。 2.4 样品溶液的制备 2.4.1 渗滤提取 称取川芎、香附粉末或不同比例的川芎和香附粉末混合物（1∶1，1∶2，2∶1）适量，装入层析柱，先用10倍量石油醚渗滤，收集渗滤液，低温减压回收石油醚得油性成分；剩余药渣再用10倍量75%乙醇液渗滤，收集渗滤液，合并石油醚萃取成分乙醇定容至100 mL棕色容量瓶。 2.4.2 水煎煮提取 称取川芎、香附粉末或不同比例的川芎和香附粉末混合物（1∶1，1∶2，2∶1）适量，加10倍量水，分3次常规煎煮，分离煎煮液，定容至100 mL棕色容量瓶。 2.4.3 超声提取 称取川芎、香附粉末或不同比例的川芎和香附粉末混合物（1∶1，1∶2，2∶1）适量，加10倍量水，称重，100 Hz超声30 min，补重，过滤后待测。 2.5 线性关系考察 2.5.1 藁本内酯线性关系考察 取适量藁本内酯对照品溶液，精密配制成浓度分别为：2.500、5.000、25.000、50.000、75.000、100.000、125.000 μg/mL的标准溶液，色谱条件下进样分析。以峰面积对藁本内酯浓度进行回归，0.5000～125.0000 μg/mL范围内线性良好，回归方程：Y = 56.02X+ 21.43，r = 0.9999。 2.5.2 阿魏酸线性关系考察 取适量阿魏酸对照品溶液，精密配制成浓度分别为1.200、6.000、24.000、48.000、72.000、108.000、144.000 μg/mL的标准溶液，色谱条件下进样分析。以峰面积对阿魏酸浓度进行回归，1.2～144.0 μg/mL范围内线性良好，回归方程：Y = 54.05