(分析化学课件)第十一章荧光分析法.ppt

仪器分析 第十一章 荧光分析法 第一节 基本原理 一、分子荧光 （一）分子荧光的产生 1．分子的电子能级与激发过程 ? = hc ?E S0 S1* T1* 电子能级的多重性 M＝2s＋1 吸收 振动驰豫 荧光 内转换 外转换 磷光 体系间跨越 （二）激发光谱与发射光谱 excitation spectrum ? 横坐标?ex，纵坐标 发射光强度 fluorescence spectrum ? 横坐标?em，纵坐标 发射光强度 溶液荧光光谱的特征 Stokes shift 荧光光谱的形状与激发波长无关 荧光光谱与激发光谱的镜像关系 二、荧光与分子结构 荧光寿命(?f)和荧光效率 (?f) Ft = F0 e -t /?f ln F0 Ft ? f = 发射荧光的光子数 吸收激发光的光子数 一般物质 ? f 0~1之间 有机化合物分子结构与荧光的关系 长共轭结构 刚性和共平面性 取代基 荧光试剂 荧光胺 Dansyl-Cl 邻苯二甲醛(OPA) 测定无机离子的荧光试剂 三、影响荧光强度的外部因素 温度 溶剂 pH值 荧光熄灭 散射光 极性溶剂 溶剂粘度 瑞利散射 拉曼上式 荧光熄灭剂 荧光自熄灭 选择适当的激发波长可消除拉曼光的干扰 第二节 荧光定量分析方法 一、荧光强度与物质浓度的关系 F=K’(I0-I) I=I010-ECL F=