猪胚胎干细胞建系研究进展.pdfVIP

动物医学进展，2010，31(11)：86—91 in Medicine Progress Veterinary 猪胚胎干细胞建系研究进展 王 磊，陶 勇，章孝荣。，宋锐 (安徽农业大学动物科技学院，安徽合肥230036) 系研究虽已历经十多年，且已有建立猪类ES细胞系的报道，但由于其培养和鉴定方法基本都是借鉴小鼠和 人的ESCs建系，从而使其培养体系存在着极大的不可靠性，至今未有种系嵌合的猪ESCs建系成功的报道。 性分子以及ESCs研究中出现的新理论进行了综述。 关键词：胚胎干细胞；细胞系；鉴定方法；多能性分子；猪 中图分类号：$852．161 文献标识码：A stem 胚胎干细胞(embryoniccell，EsC)是从囊胚 猪ESCs多潜能性维持是否有效还需进一步论证。这 cell 内细胞团(innermass，ICM)中获得的，具有自我些都是一直困扰着猪ESCs建系研究的未解之谜。 更新、分化可塑性和种系嵌合能力的一类全能细 1猪胚胎干细胞分离培养的影响因素 胞[1]。它是医学和生物工程研究的重要工具，将其用 1．1取材 于器官移植、细胞治疗、提高转基因效率等是目前干 ESCs来源于胚胎外胚层，胚胎不同发育时期外 细胞研究的热点[2。3]。猪是人类疾病的良好动物模 胚层细胞分化状态不一致。胚龄小则ESCs分化程 型，也是异种器官移植的理想材料[4]，猪E．SCs研究将 度低而具有全能性；胚龄大则ESCs部分或全部失 加速转基因猪在人类异种器官移植上的应用。利用 去全能性。对于自然胚来说，猪胚胎外胚层形成时 猪nSCs易于进行遗传操作和重构胚发育率高的优 期在囊胚孵出前，完成于配种后12d左右，这表明 点，以ESCs作为载体提高转基因猪的制备效率将是在囊胚孵出前(配种后6d～7 d)也许无明显外胚层 转基因技术的重要突破。 出现，而事实上猪胚泡附植在配种后17d左右，因 目前猪ESCs的研究仍集中在分离和传代方法的 此发育后期阶段囊胚较容易收集并用于ESCs分离 优化上，现在还没有可靠的方法分离猪F．SCs并很好 d～9 培养[3]。猪7 d的胚胎ESCs原代克隆率最 地维持其干细胞特性。虽然在猪上有许多关于类ES 细胞系的报道，但都未获得有种系嵌合能力的细胞 培养ESCs效果最佳。以上差异可能与研究所用猪 系；也一直没有猪特异的、可靠的方法来证明完全是 种和培养体系不同有关。对于体外生产(锄vitro ES细胞系，更没有像小鼠、人的ESCs那样成功用于 医学研究或基因工程研究。猪ESCs分离纯化难、传 体外培养体系还不完善，不足以维持胚胎充分发 代次数低、易分化是导致建系成功率低的主要方原 因。猪的F．SCs与小鼠、人的有很大的不同：在人和鼠 高，这在很大程度上影响从IVP胚胎分离培养猪 上表达的干细胞分子标记在猪上不一定表达，猪可能