HCG注射后到授精时间间隔大于42小时对胚胎质量影响探究.docVIP

HCG注射后到授精时间间隔大于42小时对胚胎质量影响探究 　　【摘要】 目的：探讨体外受精胚胎移植中hCG注射后授精时间间隔超过42 h对胚胎质量的影响。方法：将进行常规体外受精-胚胎移植519个周期的5493枚卵子分为两组，A组hCG注射后授精时间间隔大于42 h授精，B组hCG注射后授精时间间隔小于40 h授精，均于受精后16～18 h左右去除卵丘细胞观察授精的情况，分别统计并比较两组的受精率、卵裂率、优质胚胎率和可利用胚胎率。结果：两组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、可利用胚胎率比较差异无统计学意义（P0.05）。结论：IVF-ET中取卵后在超过最佳授精时间授精并不影响胚胎的质量。 【关键词】 体外受精-胚胎移植； 授精时间； 胚胎质量 在常规体外受精- 胚胎移植（IVF-ET）中，现在大多中心将授精时间安排在hCG注射后42 h内进行，精卵共孵育后16～18 h后去除卵丘细胞进行原核的观察。本中心在2011年11月前授精时间均安排在hCG注射后43～44 h左右，2012年开始改为hCG注射后39～40 h。为了探明IVF-ET中hCG注射后授精时间延迟是否影响胚胎质量，笔者分析了本中心推迟授精3～4 h前后两个时段授精后的相关临床资料，希望能为临床提供相关的基础数据。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选择2010年1月-2013年4月在本中心行常规体外受精- 胚胎移植（IVF-ET）的患者。纳入标准：年龄≤35岁，长方案。 1.2 方法 1.2.1 获取卵母细胞 采用黄体中期长方案降调节。前1个月经周期第3天开始妈富隆口服1片/d，17 d后或自然周期B超监测排卵后7 d开始给药短效达菲林1.0 mg/d或0.05 mg/d皮下注射垂体降调节至hCG日。促排卵采用果纳芬（GonalF，瑞士Serono公司），根据B超监测卵泡大小和血清雌二醇（E2）水平适当调整药物剂量，当大卵泡数量占14 mm卵泡30%以上停用促性腺激素，当晚8点肌肉注射hCG（丽珠公司）10 000 IU，36～38 h后在B超引导下取卵。从卵泡液中挑出卵冠丘复合物（OCCC），移入含10%血清代用品（SPS）（IRVINE，USA）的人输卵管液（HTF）（IRVINE，USA）培养液，37 ℃、5% CO2培养箱培养，6 h后行常规体外受精（2012年以后4 h后行常规体外授精）。 1.2.2 精子准备 患者丈夫禁欲3～7 d，取卵当天上午9点左右手淫法取精，精液置室温下30 min，液化后采用密度梯度离心方法处理：用精子分离液（美国SAGE IVF，Inc.公司）80% PureCeptionTM 1.5 ml放在15 ml离心管底部，上层缓缓加入1.5 ml 40% PureCeptionTM分离液，最后加1.5～2.0 ml液化好的精液，300 g离心10 min，取精子沉淀，加入Quinns HTF 受精培养液2 ml洗涤，200 g离心5 min；取精子沉淀滴入孵育后的Quinns HTF受精培养液0.5 ml中，调整精子浓度为20～40×106/ml，放入6 ml圆底试管内，置于5%、CO2、37 ℃培养箱内培养，使精子获能。 1.2.3 常规体外受精与胚胎培养 取卵后42～43 h（2012年以后39～40 h），按常规体外受精方法加入优选后的精子，置37 ℃、5%、CO2培养箱；于授精后16～18 h后拆除颗粒细胞，观察受精情况。然后移入含10% SPS（IRVINE，USA）的1026（IRVINE，USA）培养液中；每日上午8：00左右观察。将为2011年前为A组，2012年后为B组，统计并比较两组的受精率、卵裂率、优质胚胎率及可利用胚胎率。 1.3 胚胎质量评估 正常受精的标准是见到两个清晰的原核。在受精后第3天，观察卵裂球的形态，并且根据卵裂球形态与大小、有无多核、碎片多少、分布及胞浆情况等进行胚胎评分，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胚胎，第三天卵裂球数≥7，碎片≤15%，无不均及多核为优质胚胎。 1.4 统计学处理 采用SPSS 18.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料采用 字2检验，以P0.05），虽然B组的可利用胚胎率有增高的趋势，但差异无统计学意义，见表1。 3 讨论 通常在IVF/ICSI治疗周期中，用外源性Gn对患者进行控制性促排卵，使在1个排卵周中使多个卵泡发育，通过获得比较多的卵子来提高每一个周期的妊娠率。在促排卵过程中，一般使用外源性hCG来模拟LH峰促使卵母细胞最后成熟、从而达到诱导排卵的目的[1]。在超促排卵过程中，目前普遍认为在注射hCG后38～40 h内发生排卵，一般通过B超引导下取卵的时间控制在34～36 h，这样可以尽可能防止卵