超滤分离具有壳聚糖酶活力的木瓜蛋白酶 separation of papain with the chitosanase activity by ultra-filtration.pdfVIP

第23卷第6期 歹OOD＆mCH眦RY V01．23，N。．6 2007年11月 1 k。|躐；‘鼢辆-巍“盛 Nov．2oo7 超滤分离具有壳聚糖酶活力的木瓜蛋白酶 uItra-f¨tratiOn Of withthe’chitosanaSe SeparatiOnpapain actiVityby 谭 晶 陈季旺 夏文水 舒 静 TAN XlAWen·slmisHU J堍CHEN Jt-tl}￡mg Ji鸭 (武汉工业学院食品科学与工程院，湖北武汉430023) 摘要：目的：研究超滤法分离具有壳聚糖酶活性的木瓜蛋白 风干燥、喷雾干燥或冷冻真空干燥等方法制得粗酶H1，将粗 酶，操作时间压力、浓缩倍数对膜通量及酶活力和收率的影 酶分级盐析沉淀，再将沉淀多次结晶1或通过超滤除杂酶以 响，并对超滤浓缩的工艺条件进行优化；结果：室温下，超滤 制得纯度较高的木瓜蛋白酶制剂。一般工业生产中，从番木 分离浓度为0．5％的木瓜蛋白酶溶液，压力为0．1MPa，浓缩 瓜青果中提取出来的白色乳汁经加工而成的木瓜蛋白酶酶 倍数为8倍时．超滤后木瓜蛋白酶的蛋白酶和壳聚糖酶比活 制剂不是纯酶。这些粗酶中的主要酶成分是木瓜蛋白酶、木 力分另1从435．10U／mg和2．17U／Ing提高到531．39U／IIIg 瓜凝乳酶和木瓜蛋白水解酶Q(也称木瓜肽酶)，此外还含有 和2．65U／mg，纯化倍数为1．22倍；超滤前后木瓜蛋白酶的 蛋白质含量由29．56％提高到79．96％，还原糖含量由少量的杂酶和大量的还原糖等哺t7】。为进一步了解木瓜蛋白 57．46％降低到6．27％。 ’ 酶中对壳聚糖具有降解作用的酶组分，有必要对木瓜蛋白酶 关键词：木瓜蛋白酶；壳聚糖酶活力；超滤；凝胶电泳 制剂进行分离纯化。 tlli8 WitlltlIe Ah炯d：obj酬ve：IIIpaper，papainclIit倜脚la∞∞ti“ty t∞hIlical∞nditio珊ofultra-fil枷on超滤是一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，小分 w鹪卵paratedby妇·filtmtion，the Btudied蚰d山ee如出of wem pDe姻um“∞眦entrati伽6n瑚蚰Ill眦·子溶质和溶剂能穿过一定孔径特制的薄膜，大分子溶质不能 filtration mte pe珊eg比Ⅱu，∞tjv时蛐d出eyield we忙inve8ti弘ted． 透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到部分的纯化。 when intIIeIoom CbⅡd味n：The龙sultssho№d pBpaillw衄sep日rated 超滤自20世纪20年代问世后，已成为一种重要的生化试验