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第四章 农业微生物工程 本章内容 第一节 生物农药 第二节 生物肥料 第三节 生物饲料 第四节 生物治污 第一节 生物农药 生物农药是指由生物体产生的具有防治病、虫害和除杂草等功能的一大类物质的总称。 主要包括微生物杀虫剂、农用抗生素制剂和微生物除草剂等。 应用生物农药来对病虫害和杂草进行防治称为生物防治。 生态农业、绿色农业、可持续农业 一、微生物杀虫剂 目前的微生物杀虫剂： 病毒杀虫剂、 细菌杀虫剂、 真菌杀虫剂 放线菌产生的杀虫素等。 1、病毒杀虫剂 重要的杀虫病毒 世界，1200种；中国，200种。 利用昆虫病毒防治农林害虫最早始于20C40S：Balch和Bird，核型多角体病毒，控制云杉叶蜂危害。 目前，研究利用主要： 核型多角体病毒、 颗粒体病毒、 质型多角体病毒 浸染鳞翅目、双翅目和膜翅目昆虫。 （1）核型多角体病毒（NPV） NPV为DNA病毒，宿主专一，对人、植物及害虫的天敌均无危害。世界卫生组织和粮农组织推荐使用。 我国已有防治棉铃虫的商品杀虫剂。 作用机理：病毒→昆虫消化道→→病毒粒子→中肠上皮细胞复制→→组织间传播。 昆虫3-5天后死。 （2）颗粒体病毒（GV） GV为DNA病毒，法国Poillot发现。 病毒在昆虫肠道中溶解并释放出病毒颗粒。昆虫随后出现反应迟钝，停止取食而死。 （3）质型多角体病毒（CPV） CPV为RNA病毒，可由卵传染给昆虫子代。 应用价值更大。 病毒制剂的生产 活的宿主昆虫增殖和细胞培养法来生产。 20C60S，昆虫人工饲养→→病毒制剂工业生产。 棉铃虫核型多角体病毒制剂生产工艺： ①棉铃虫幼虫的饲养繁殖； ②人工使幼虫感染病毒； ③收集多角体病毒； ④加工配制病毒制剂。 2、细菌杀虫剂 细菌感染的类型 杀虫细菌主要通过口器和消化道感染昆虫，一般分为三种类型： 1）菌血症：细菌在昆虫体内繁殖，大量消耗昆虫体内的营养物质，昆虫生理饥饿而死亡。 2）败血症：细菌在昆虫体内繁殖并产生毒素，昆虫中毒而死。 3）毒血症：细菌在昆虫肠腔中产生毒素，毒素进入体腔而引起昆虫中毒，但细菌不进入体腔。 苏云金芽孢杆菌（Bt） 目前研究最多、用量最大的杀虫细菌。 1901，日本，石渡，蚕尸， “猝倒杆菌” 。 1911，德国，Berliner，地中海粉螟，苏云金芽孢杆菌。 1951，开始利用。 Bt菌毒蛋白特异性毒杀鳞翅目和膜翅目昆虫。生物工程改造后，杀虫效果提高，杀虫范围扩展：鳞翅目、膜翅目、双翅目、鞘翅目、同翅目、直翅目、虱目等昆虫以及线虫、螨类等害虫。 目前，150多血清型，美国Mycogen公司，生产销售3种细菌杀虫剂：MVP、M-Trak和M-Peril，分别防治蔬菜害虫、马铃薯甲虫和玉米螟。 Bt昆虫抗性与抗性治理 目前数百种昆虫和螨类对化学农药产生抗药性。 抗性治理方案： 1）超大剂量喷施毒素。 2）为敏感昆虫提供避难所。 3）多种Bt毒素复合使用。 4）利用生物技术开发新毒素。 3、真菌杀虫剂 真菌种类最多，约占60%以上，数量750种。 目前，大规模商业化生产阶段。 1）真菌杀虫过程 首先，真菌孢子黏附于昆虫表皮，萌发，分泌水解酶，造成昆虫体壁局部溶解。 随后，芽管穿透体壁进入昆虫体内。 最后，真菌在昆虫体内各器官大量生长，造成昆虫生理饥饿而死。 真菌休眠，等待下一循环的寄生。 突出特点：寄生循环性 2）重要的杀虫真菌类群 半知菌亚门的丝孢目 接合菌亚门的虫霉目 我国成功经验：白僵菌的应用（属于半知菌亚门的丝孢目真菌）用于防治松毛虫、松针毒蛾、油桐蚜虫、茶叶毒蛾、杨树天牛、大豆食心虫等害虫。 利用真菌防治柑桔锈病。 3）真菌杀虫剂生产程序 ①在斜面上培养原始菌种（约10天）； ②转入液体摇床培养（约30天）； ③在固体培养基上扩大培养或进行液体深层发酵（约6天）； ④收集培养或发酵产物进行干燥处理； ⑤粉碎过筛； ⑥经质检后形成产品。 二、动物杀虫剂 1、原生动物杀虫剂 微孢子虫，使用最广，控制鳞翅目、双翅目和鞘翅目害虫。短期。 2、线虫杀虫剂 新线虫和索线虫两种： 新线虫，防治土壤害虫、钻蛀性害虫及卷叶害虫等，对人及其它哺乳动物安全。DD-136。 索线虫，主动浸染宿主，感染率较高，造成昆虫流行病。食蚊罗索线虫。 三、生物除草剂 1、杂草的危害 世界，每年204亿美元。 中国，每年6亿亩，减产达