- 1、本文档共9页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
含笑内酯对类风湿关节炎小鼠模型治疗作用探究
含笑内酯对类风湿关节炎小鼠模型治疗作用探究 [摘要] 目的 探讨含笑内酯对类风湿关节炎DBA/1小鼠模型的治疗作用。 方法 将40只6周龄雄性DBA/1小鼠随机分为4组:未处理的空白对照组(Nor组)、诱导发病并注射甲氨蝶呤药物的甲氨蝶呤治疗组(MTX组)、诱导发病并注射含笑内酯的实验组(MCL组)和诱导发病并注射DMSO的模型对照组(Con组),用牛Ⅱ型胶原法诱导MTX、Con和MCL组小鼠发病建立类风湿关节炎模型;在二次免疫注射24 h后开始隔天腹腔注射给药并对小鼠体重和关节炎发病情况进行隔天观察,给药28次后停止用药,眼球取血、蛋白芯片测血清中细胞因子,处死小鼠取爪子及膝盖做组织病理学检查。 结果 成功构建了DBA/1小鼠类风湿关节炎模型;各组小鼠之间体重差异无统计学意义(P 0.05);关节炎评价显示MCL组低于Con组(P 0.05); the evaluation of arthritis displayed that the MCL group was lower than that in the group Con (P [Key words] MCL; CIA; DBA/1; MTX
类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种全身性自身免疫性疾病,主要表现为慢性、对称性、进行性多关节炎[1]。类风湿性关节炎以关节滑膜炎为特征,反复持久发作,可导致关节内软骨和骨破坏,关节功能障碍,甚至残废。类风湿性关节炎发病呈全球性分布,我国的发病率为0.32%~0.36%[2]。目前副作用较小的治疗类风湿关节炎的药物不多,相关药物还有待于进一步研究。
含笑内酯(micheliolide,MCL)是近几年研究者从70多种药物中筛选出来的一种小分子化合物,其主要成分为倍半萜内酯[3],它可以用小白菊内酯为原料,在一定的溶剂和温度下反应得到[4]。含笑内酯衍生于小白菊内酯,其活性与小白菊内酯相当,但它在血浆中稳定性比小白菊内酯高,成本比小白菊内酯低[5],因此更适于作为临床药物研究。在此次研究中,笔者构建了类风湿关节炎DBA/1小鼠模型,并用MCL和MTX来治疗小鼠,从而探究MCL对类风湿关节炎的治疗效果是否可靠。同时应用蛋白芯片,检测MTX治疗后小鼠血清中细胞因子的变化。现报道如下:
1 材料与方法
1.1 实验材料
DBA/1小鼠购自北京华阜康生物科技股份有限公司;牛Ⅱ型胶原、费氏完全佐剂、费氏不完全佐剂购自chondrex公司;MCL由南开大学药学院陈悦教授提供;甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)注射液购自山西普德药业股份有限公司,DMSO 购自天津市风船化学试剂科技有限公司,小鼠细胞因子检测试剂盒购自RD公司。
1.2 构建类风湿关节炎DBA/1小鼠模型
订购40只SPF级DBA/1小鼠,6周龄,雄性;SPF级饲养1周,让小鼠熟悉环境,对小鼠进行编号并随机分为四组:空白对照组(Nor组)、模型对照组(Con组)、甲氨蝶呤治疗组(MTX组)和实验组(MCL组),每组10只。其中Nor组小鼠不作任何处理,对其他三组小鼠进行造模:将2 mg/mL牛Ⅱ型胶原与1 mg/mL费氏完全佐剂等体积混合乳化,使得牛Ⅱ型胶原终浓度为1 mg/mL。对7周龄小鼠进行初次免疫,每只小鼠尾根部皮下注射100 μL牛Ⅱ型胶原的费氏完全佐剂混合液,并记为造模第0天;在造模第21天,将100 μL含100 μg牛Ⅱ型胶原的费氏不完全试剂混合液注入小鼠尾根部皮下,进行加强免疫[2,6-7]。
1.3 给药观察
造模第22天开始对三组造模小鼠进行腹腔注射给药,根据前期预实验的结果确定MCL组给予溶解于DMSO的MCL药物浓度为30 mg/kg,MTX组给予溶于生理盐水的MTX的浓度为6.6 mg/kg[8],Con组注射等量的溶剂DMSO,隔天给药,给药28 d。造模第23天开始隔天对小鼠进行体重检测和关节炎症状评价。其中关节炎症状评价包括前后抓足掌厚度测定和关节炎评分两方面。关节炎评分标准:正常为0分;轻微的但有明确的发红和腕关节或踝关节发炎为1分;中等程度的发红和腕关节或踝关节发炎为2分;整个爪子包括脚趾严重的发红发炎记为3分;涉及多关节,四肢的最大程度的红肿、关节变形、功能损伤为4分。四只爪子得分相加为小鼠关节炎总评分[9]。
1.4 眼球取血分离血清
给药停止后继续隔日观察8 d,对小鼠进行摘除眼球采血,分离血清并保存于-20℃。
1.5 制备病理标本
解剖小鼠,取爪子、膝盖,剔除结缔组织、肌肉组织,浸泡在4%甲醛溶液中进行组织固定,石蜡包埋,切片,HE染色,封片,病理分析,选取爪关节、膝关节进行半定量评分。每个关节的
您可能关注的文档
- 压力变送器工作原理研究.doc
- 县域教育共同体文化考察和重构.doc
- 县域经济和民营企业协调发展状况研究.doc
- 县域经济金融运行中应关注几个问题探究.doc
- 县市区文化影视产业发展思索.doc
- 县市区域性报纸未来发展路径.doc
- 县级供电企业安全管理探究.doc
- 县级供电企业党建工作探索和思索.doc
- 原油氯含量探究与测定方法.doc
- 县级供电公司综合营销效果评价体系探究.doc
- 《中国通史》文字稿第12集春秋争霸.docx
- java教程--类与对象-讲义课件(演讲稿).ppt
- Vue应用程序开发-(1).pptx
- 东北师大版社劳动实践与评价指导手册一年级上册主题二活动一寻找五彩的树叶课时课件.pptx
- 外研版英语四年级上册 Module 4 Unit 2 How much is it单元教学设计.docx
- 外研版英语四年级上册Module 4 单元整体教学设计.docx
- 6《上课之前》课件 鄂科技版 心理健康教育一年级.pptx
- 《1~5的认识》说课课件(共25张PPT)人教版一年级上册数学.pptx
- 六《解决问题(1)》说课课件 人教版 三年级上册数学.pptx
- 七《解决问题》说课课件 人教版 二年级上册数学.pptx
最近下载
- 村志提纲 村志内容提纲(完整).doc
- 导游员(讲解员)大赛题库及答案(共500道).doc
- 高中英语课件:课件选择性必修三Unit3Reading第一课.pptx
- 共享雨伞商业计划书.pptx
- 轻型井点降水专项的施工方案.doc
- 中医药适宜技术推广基地建设方案.doc
- 《金版教程(物理)》2024导学案必修第一册(人教版新)第二章 匀变速直线运动的研究第2章 水平测评含答案.DOCX
- 7-12个月婴儿言语发展游戏设计与指导.pptx VIP
- 考试黔东南公司化验室SSGLP体系培训试题附有答案.docx VIP
- 安徽省亳州市2024-2025学年高三上学期开学考试 化学 PDF版含解析.pdf
文档评论(0)