紫外线B照射的供体脾细胞预输注对异体神经移植影响的研究-骨科学专业毕业论文.pdfVIP

紫外线B照射的供体脾细胞预输注 对异体神经移植影响的研究 捅要 背景和目的：长期以来，周围神经损伤的修复对于骨科医务工作者都是一个难题。临床上， 用于治疗周围神经损伤尤其是长段损伤或缺损的方法中，自体神经移植术仍是最可靠的治 疗手段，但是供区神经功能损失及可供缝合神经长度及直径有限是不可克服的缺点。硅胶 管等各种合成材料和自体骨骼肌、静脉等生物源性材料可引导神经再生，但其结构与神经 基底膜不同，轴突再生欠佳，临床应用价值不大，同种异体神经移植可克服上述缺点，但 存在排斥反应问题。 本研究旨在：通过尾静脉预输注经紫外线照射的供体脾细胞及同种异体坐骨神经移植 后，测定大鼠外周血T淋巴细胞亚群，探讨周围神经缺损修复的可行性。为修复周围神经 缺损提供一种新的方法。 研究方法： 选用成年雄性供体SD大鼠，消毒后无菌摘取脾脏，即制成单细胞悬液。用中波紫外 线荧光灯照射，强度剂量为12000J／m2，用0．2％台盼蓝染色计数细胞活率大于95％。以尾 X 静脉方式给予Wister受体鼠，总量2．5107个细胞的供体SD鼠脾细胞。根据周围神经移 为异体神经移植组、Ⅲ组为尾静脉预输注经紫外线照射的供体脾细胞异体神经移植组，桥 检查外周血T淋巴细胞亚群，术后8周、12周进行小腿三头肌湿重、神经电生理学、电镜 组织学检测。 结果： 术后7、14天免疫学检查示，应用单因素方差分析对三组进行统计学分析。结果显示： 坐骨神经移植术后7天，外周血T淋巴细胞亚群检查中，Ⅲ组较II组的CD8T淋巴细胞的 比值变小，差异有统计学意义(P0．05)。这表明尾静脉预输注经紫外线照射的供体脾细 胞减弱了近期内(2周内)的特异性免疫反应。术后8周，小腿三头肌湿重、运动神经传 导速度， III组优于II组，差异有 (PO．05)。术后12周，小腿三头肌湿重、运动神经传导速度， 观察结果显示：I组可见神经纤维内有大量再生的髓鞘及轴突，许旺细胞功能活跃，新生轴 突内微丝密集排列，线粒体较大，轴膜清晰可见，有髓神经纤维较粗，髓鞘厚，板层清晰可 见，雪旺氏细胞增生明显。II组可见大部分神经纤维脱髓鞘崩解，轴突消失，未见再生的神 经纤维。Ⅲ组可见大量的再生神经纤维，轴突内微丝密集排列，线粒体嵴电子密度增高， 雪旺氏细胞包绕再生轴突形成有髓神经纤维，神经纤维排列规则紧密，结缔组织少。 ‘ 结论： 尾静脉内注射去抗原的异基因脾细胞经抗原呈递细胞(主要是树突状细胞)处理呈递， 诱发免疫耐受的发生。外周静脉耐受是导致机体免疫耐受的重要方法，外周静脉异基因脾 细胞亦可以诱导器官移植耐受。所以经外周静脉紫外线B照射去抗原的异基因脾细胞可以 诱导对异体神经移植的特异性免疫耐受。可诱导对异体神经移植的特异性免疫耐受。移植 效果接近自体神经组。 关键词： 紫外线脾细胞神经移植免疫耐受 II 山西医科大学硕士学位论文 Abstract and Purpose： Background Fora of nerve for medicalworkersarea longtime，therepairperipheralmjuryorthopedic thetreatmentof nerve in or peripheralinjuryparticularlonginjury problem．Clinically，for