丹皮酚对缺糖缺氧再灌注损伤大鼠海马神经元EAA、NMDA受体表达的影响及机制探讨.pdfVIP

山东医药2013年第 53卷第47期 丹皮酚对缺糖缺氧再灌注损伤大鼠海马神经元 EAA、NMDA受体表达的影响及机制探讨 宋宁宁 ，李 剑 。刘向红 ，高海青 (1山东大学齐鲁医院，济南250012；2济南市第五人民医院) 摘要：目的 观察丹皮酚对缺糖缺氧(OGD)~ 注损伤大鼠海马神经元兴奋}生氨基酸(EAA)、N．甲基．D．天门冬氨 酸(NMDA)受体表达的影响，探讨该药的神经保护作用机制。方法 原代培养新生大鼠海马神经元8～12d后随机分为 4组，其中对照组正常换液培养；模型组、丹皮酚组、地佐环平(MK-801)组均制备OGD再灌注损伤模型，在此基础上丹皮 酚组于每个再灌注时间点前分别加入丹皮酚，MK．801组则加入MK一801溶液；倒置相差显微镜下观察神经元一般形态学 变化，用MIT法测定神经元存活率，分别采用放射配基结合实验及RT-PCR法测定NMDA受体结合力、NR1亚基mRNA 表达，以氨基酸分析仪检测EAA含量。结果 模型组神经元肿胀或变形，突起缩短并逐渐消失，胞质内颗粒变性明显、甚 至完全崩解；丹皮酚组及MK-801组神经元形态改变均较模型组减轻，胞体完整，突起较清楚，基本保持完整。与对照组比 较，模型组神经元存活率明显降低，NMDA受体结合力、NR1亚基mRNA表达及E从 含量明显升高，而丹皮酚组及MK- 801组上述指标均较模型组明显改善(P均0．05)。结论 丹皮酚对离体培养的大鼠海马神经元OGD再灌注损伤具有 保护作用，其作用机制可能与抑制EAA及NMDA受体表达有关。 关键词：丹皮酚；神经元；缺糖缺氧再灌注损伤；N一甲基一D一天门冬氨酸受体；兴奋性氨基酸 doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2013．47．002 中图分类号：R741．05 文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2013)47-0004-04 EffectofpaeonolonEAA．NMDA receptorinculturedrathippocampalneurons subjectedtooxygen—glucosedepriVation／reperfusion—inducedinjury SONGN g—ningL，LIJian，LIUXiang—hong，GAOHai—qing (1QiluHospital，ShandongUniversity，Jinan250012，China) Abstract：Objective Toobservetheeffectofpaeonolonexcitatoryaminoacid( )，N-methyl—D-aspartate(NMDA) receptorexpressioninculturedrathippocampalneuronssubjectedtooxygen—uc0sedeprivation／reperfusion(OGD／R)一induced injuryandtoinvestigateitsneuroprotectivemechnaism．Methods Wedi~dedrathippocampalneuronswhichwereprimarily culturedfor8-12dintoofurgroups：htecontrolgroup，OGD／R group，paeonoltreatmentgroupandMK一801group，andthenwe establishedthemodelsofOGD／R—inducde injury，paeonolandMK-801solutionwereseparatelyinjectedintoratsofthepaeonol treatmentgroupandMK-801groupateachreperfusiontimepoints．ThemorphologicalchangesofneulFonswereobservedbythe invertde phase·contrastmicroscopy，theneuronviabilitywas measurde byMTrassay，thebindingforceof NMDA recepto