PDGFRB基因重排检测方法的建立.pdfVIP

分子诊断与治疗杂志 2014年 1月 第 6卷 第 1期 JMolDiagnTher,January2014，Vo1．6No．1 · 论 著 · PDGFRB基因重排检测方法的建立 何瑰 张文博 【摘 要 】 目的 建立荧光原位杂交技术 (fluorescentinsituhybridization，FISH)检测PDGFRB基 因重排的方法。 方法 依据PDGFRB断裂重排方式 ，设计、制备双色荧光探针。 以人外周血培养淋巴 细胞为检测对象评价 PDGFRB基因重排检测探针的灵敏度和特异性 ，建立阴性阈值。 以白血病患者的 骨髓和外周血样本为对象进行 PDGFRB重排检测性能评价。 结果 本研究建立的FISH检测方法在人 外周血培养淋巴细胞检测中特异性和灵敏度均达到 100％，在对28例样本检测中，筛查出 1例PDGFRB FISH阳性样本。 结论 本研究制备的双色荧光探针可用于PDGFRB基因重排检测。 【关键词 】 白血病；PDGFRB；荧光原位杂交 EstablishmentofPDGFRBgenerearrangementdetectionmethod HEGui ，ZHANGWenbo (LBPMedicineScienceTechnologyCo．，Ltd，Guangdong，Guangzhou510665，China) A【BSTRACT】Objective TodevelopanassayforPDGFRBrearrangementdetectionbasedonFISH technology． Methods AccordingtoPDGFRBrearrangementmanne~dual—colorFISH probesweredesigned andprepared．Humanperipheralbloodlymphocytesastestingobjecttoevaluatethesensitivityandspecificity oftheprobethatdetectedPDGFRB generearrangement，and establishedhtenegativethreshold． Results BothspecificityandsensitivityofthisFISH assayreached100％ inperipheralbloodlymphocytes．In28cases ofsamples，onecasesofPDGFRB positivesampleswasscreenedoutbyFISH． Conclusion Thedual—color fluorescentprobescouldbepreparedofrPDGFRBgenerearrangementdetection． IKEYWORDS】Leukemia；PDGFRB；FISH 血小板源性生长因子(PDGF)是血清中的一种 两种结构相似的酪氨酸激酶受体 PDGFR仪、8。两 强有丝分裂原分子，可刺激成纤维细胞、内皮细胞、平 者同属Ⅲ型酪氨酸激酶受体家族，其共同结构包括胞 滑肌细胞的增殖，其受体在人巨核细胞和巨核细胞系 外区5个免疫球蛋 白样结构域、1个穿膜结构域、1个 有表达。PDGF一方面通过与其受体相互作用刺激 ATP结合位点和 1个胞 内亲水激酶插入域 川。 细胞 cfos的表达，促进细胞有丝分裂，另一方面它可 血小板源性生长因子受体 ．B (platelet．derived 作用于骨髓微环境的间质细胞，使间质细胞产生更 growthfactorreceptorbeta，PDGFRB)位 于5q32，编 多的细胞因子，间接促进巨核细胞的生长。目前发现 码跨膜酪氨酸激酶受体蛋白，涉及伙伴基因超过 15 PDGF受体 (PDGFR)基因重排可导致受体酪氨酸激 个。2008年WHO进行造血与淋巴组织肿瘤分类修 酶分子调控机制及信号转导通路的持续性激活和造 订，依据临床表现和用药敏感