非O1、非O139型霍乱弧菌中首次发现PER-1超广谱β内酰胺酶.pdfVIP

338 中国感染与化疗杂志2010年 9月 20日第 10卷第5期 ChinJInfectChemother，September．2010 Vo1．10，No 5 · 论 著 · 非 O1、非 O139型霍乱弧菌中首次发现PER一1 超广谱 l3内酰胺酶 孙景勇， 倪语星 摘要 ： 目的 明确非 01、非O139型霍乱弧菌 中ESBL的基 因型及其遗传背景 ，以探讨该耐药基因传播的机制。方法 通过 表型确证试验确定细菌是否产生 ESBL，通过接合试验了解 ESBL是否 由质粒介导，通过 PCR扩增和序列分析确定ESBL的基 因型 ，通过反向PCR和序列分析 了解 ESBL基 因两侧 的结构。结果 ESBL表型确证试验确认菌株 RJ354为产 ESBL菌株 ， 接合试验证实 ESBL基 因位于可接合质粒上，PCR、反 向PCR扩增和序列分析确定其基 因型为 bla R．，该基 因上游序列为 ORF513，下游为 gst—like基 因。结论 本研究国际上首次在从非 Ol、非 O139型霍乱弧菌中检 出了PER一1型ESBI，而且首次 发现该酶基因与一种新 的基 因元件 ISCR1相连 ，后者可能介导前者的水平转移 。 关键词 ： 非 01、非 ol39型霍乱弧菌 ； 超广谱 B内酰胺酶 ； PER一1； ISCR1 中图分类号 ：R378．3 文献标志码 ：A 文章编号 ：1009—7708(2010)05—0338—04 Firstidentificationandgeneticanalysisofextended_。spectrum M[actamasePER--1 inastrainofnon-O1．non-O139V／briocholerae SUNJingyong， N Yuxing． (DepartmentofClinicalMicrobiology，RuijinHospital，Shanghai JiaotongUniversity，SchoolofMedicine，Shanghai 200025，China) Abstract： ObjectiveToidentifythegenotypeanditsgeneticenvironmentoftheextended—spectrum B—lactamaseinanon一()1， non—O139Vibriocholeraeisolate．MethodsMICsandESBLsweredeterminedbyE—testfollowingCLSIguidelines．Conjugation experimentswerecarriedoutwithEscherichiacoliJ53Az toexploreiftheESBLgenewaslocatedinplasmid．PCR amplifica— tionswereperformedusing theprimersspecificforblaPER1，blasHvandblavEB．ThecompleteblaPER_1structuralgeneandits flankregionsweredeterminedbyinversePCR．Extendedsequenceanalysiswasperformedtogaininsightintothestructureand organizationoftheblaPER_1genearea．ResultsNon-O1，non—O139VibriocholeraeRJ354wasanESBL—producingstrain．This ESBLwasplasmidmediated，whichwasconfirmedbyconjugationexperiment．ThegenotypeoftheESBIwasblaPER_1．The flanklocatedupstream oftheblaPER1genewasISCR1 (ORF513)．Theflanklocateddownstream oftheblaPER1genewasgst 1ikegene．ConclusionsThisiSthefirstreportthataPER一1ESBL wasdetectedinanon-O1，non一0139Ⅵbriocholeraeisolate intheworl也 ItiSfirstfoundthatthebla