一种新型的Tet-off慢病毒调控系统的构建及其调控作用.pdfVIP

浙江理工大学学报 ，第27卷，第5期，2010年 9月 JournalofZhejiangSci—TechUniversity Vo1．27，No．5，Sept．2010 文章编号 ：1673—3851(2010)05—0805—05 一 种新型的Tet—off慢病毒调控系统的构建 及其调控作用 杨春燕 ，刘 佳 ，钱其军 (1．浙江理工大学生命科学学院，杭州 310018；2．第二军医大学东方肝胆外科医院，上海 200438) 摘 要：四环素调控的真核表达系统是真核细胞诱导表达系统的重要组成部分。当前大多数研究者采用双质 粒四环素表达调控系统调控外源基因的表达。由于，双质粒四环素表达调控 系统的基 因表达调控严格依赖于两个 单载体同时感染同一个细胞，因而限制其在体 内实验 中的效率。为解决该问题，研究构建了由慢病毒栽体构成的单 质粒四环素表达调控系统一pLV300(Tet—off)。构建的载体经酶切鉴定及测序均正确。通过荧光观察及 RT-PCR实 验结果显示，该单质粒四环素调控的慢病毒载体体外可以高效地转移并且维持 目的基因的表达，其表达调控效应 高、无明显毒