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基因治疗制品 基因治疗 基因治疗指改变人活细胞遗传物质的治疗方法。按基因导入人体的途径分两大类： 直接法：即将外源性功能基因以逆转录病毒、质粒载体或脂质体类包囊，或将裸露DNA的形式直接注入体内，让基因在体内表达。 间接法：即将受体细胞（例如淋巴细胞、骨髓干细胞、皮肤或纤维细胞等）在体外培养导入外源性功能基因，然后把这种经遗传修饰的受体细胞输回或移植入患者体内，让外源基因表达。 基因治疗 美国NIH重组DNA咨询委员会到现在已批了40多项，典型的基因治疗用于遗传病、免疫病。 美国Viagene公司研究出一种被称为“艾滋病毒免疫制剂”，该药为一种编码鼠逆病毒的核心蛋白的基因序列和HIV表面抗原RNA结合产物。HIV抗原则可使人体免疫系统去袭击受HIV感染的细胞。在小鼠、灵长类试验中确定该药能诱导出强的HIV-特异性杀伤细胞（CTL）。 基因治疗 基因治疗用于癌症已是十分活跃的研究领域。将特殊的淋巴细胞因子编码基因导入自体或同种瘤细胞，再种到患者体内。实验证明能增强免疫应答，对原发性瘤有效。还有人研究将肿瘤抑制物导入人或动物肿瘤，且看到效果。 目前试验一种更简单、快速的方法，即DNA注射法。DNA作为一种药物注射，无需从体内取出细胞、改变遗传特性的处理过程。注射的DNA起免疫系统催化剂的作用，使免疫系统识别并攻击瘤细胞，不仅直接影响注射部位，且可作用远处转移瘤。 本科生免疫学实验 “干扰素（IFN）的转化表达及双抗体夹心法检测” （一）质粒的提取 （二）感受态细胞的制备及转化 （三）IFN的诱导表达 （四）夹心法检测 （ELISA） 双抗体夹心法酶联免疫反应原理图 固相Ab Ag 底物 酶标Ab E Ab－Ag 复合物 E Ab－Ag－Ab－酶 复合物 E 显色 思考题 掌握细胞因子的概念与种类。 掌握细胞因子的作用特点。 了解细胞因子的检测方法。 了解免疫学相关的高新技术的发展方向。 下一堂课的内容为“免疫细胞膜分子” * 血液中的白细胞有五种，按照体积从小到大是：淋巴细胞，嗜碱粒细胞，中性粒细胞，单核细胞和嗜酸细胞。 * 主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex ，MHC) * PKR可抑制病毒蛋白的翻译，而2-5A合成酶则可裂解病毒RNA ，MxA：通过干扰病毒核衣壳的转运而抑制病毒衣壳的形成 * 双链RNA（double-stranded RNA, dsRNA） * * Niere肾，EPO：红细胞生成素，knochenmark骨髓 ，erythrocyten红细胞 * 辅助性T细胞（TH细胞）、抑制性T细胞TS细胞、细胞变性T淋巴细胞（TC细胞）、延迟过敏反应T细胞（TD、TH细胞）及记忆性T细胞（TM细胞） * 32P，35S 干扰素α、β、γ可干扰各种病毒在细胞内的复制，从而防止病毒扩散。 白血病抑制因子(LIF)可直接作用于某些髓性白血病细胞，使其分化为单核细胞，丧失恶性增殖特性。 三、造血细胞刺激剂 可明显刺激造血细胞集落的大小和数量。 四、炎症反应的促进剂 炎症是机体对外来刺激产生的一种病理反应过程，症状表现为局部的红肿热痛，病理检查可发现有大量炎症细胞，如粒细胞，巨噬细胞的局部浸润和组织坏死，在这一过程中，一些细胞因子起到重要的促进作用。 如IL-1，IL-6，IL-8，TNF-α等可促进炎症细胞的聚集、活化和炎症介质的释放，可直接刺激发热中枢引起全身发烧，加重炎症。 正常人肺泡 大叶性肺炎 中性粒细胞渗出 肺炎 五、其它生物学活性 许多细胞因子除参与免疫系统的调节效应功能外，还参与非免疫系统的一些功能。例如，IL-8具有促进新生血管形成的作用，M-CSF可降低血胆固醇。IL-1刺激破骨细胞，致骨细胞的生长等。 第四节 细胞因子的临床意义 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 一、细胞因子与疾病 细胞因子及其受体的缺陷 细胞因子表达过高 可溶性细胞因子受体水平升高 细胞因子及其受体的缺陷 如人类免疫缺陷病毒（HIV）感染并破坏TH后，可导致TM细胞产生的各种细胞因子缺陷，免疫功能全面下降，从而表现出获得性免疫缺陷综合症（AIDS）的一系列症状。 细胞因子表达过高 在炎症，自身免疫病，变态反应，休克等疾病时，某些细胞因子的表达量可成百上千倍地增加，而这些细胞因子均可促进炎症过程，使病情加重，应用细胞因子的抑制剂有可能治疗这类炎症性细胞因子水平升高的疾病。 可溶性细胞因子受体水平升