第四章 微生物的生理 环境工程微生物学 教学课件.ppt

本章主要内容 1、微生物的酶 2、微生物的营养 3、微生物的产能代谢 4、微生物的合成代谢 3. 几种重要的辅基和辅酶 铁卟啉：是细胞色素氧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶等的辅基，通过铁离子的变价传递电子，催化氧化还原反应。 辅酶A(CoA或CoA SH)：通过巯基的受酰和脱酰参与转酰基反应，在糖代谢和脂肪代谢中起重要作用。（泛酸） NAD(辅酶Ⅰ)和NADP(辅酶Ⅱ)：两者是多种脱氢酶的辅酶，在反应中起传递氢的作用。（VPP） FMN(黄素单核苷酸)和FAD(黄素腺嘌呤二核苷酸)：两者是氨基酸氧化酶和琥珀酸脱氢酶的辅基，是电子传递体系的组成部分，其功能是传递氢。（B2） 辅酶Q(CoQ)：是电子传递体系的组成部分，其功能为传递电子和氢。 硫辛酸(L)和焦磷酸硫胺素(TPP)：两者结合成LTPP，是α-酮酸脱羧酶和糖类转酮酶辅酶。参与丙酮酸和α-酮戊二酸的氧化脱羧反应，起传递酰基和氢的作用。（B1） 磷酸腺苷及其他核苷酸类：磷酸腺苷包括AMP，ADP，ATP；其它核苷酸包括GTP，UTP，CTP。 磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺：前者是氨基酸的转氨酶、消旋酶、脱羧酶的辅酶；后者与转氨有关。（B6） 生物素：是羧化酶的辅基，催化CO2固定和转移及脂肪合成反应。 四氢叶酸(辅酶F，THFA)：传递甲酰基及羟甲基。 金属离子：是酶的辅基和激活剂。如Fe2＋是铁卟啉环的辅基，Mg2＋是叶绿素的辅基。 辅酶M：具有渗透性和热稳定性，是甲基转移酶的辅酶，是活性甲基的载体，专性厌氧的产甲烷菌所特有。 F420(辅酶420，Co420)：是甲基转移酶的辅酶，是活性甲基的载体，其功能是作为最初的电子载体。为产甲烷菌所具有。 F430 (辅酶430) ：是甲基辅酶M还原酶组分C的弥补基，参与甲烷形成的末端发应。 MPT：作用与叶酸相似，参与C1还原反应。 MFR：在甲烷和乙酸形成过程中起甲基载体作用，产甲烷菌独有。 单体酶：一条多肽链 寡聚酶：多亚基酶 多酶体系：几种不同功能的酶聚合在一起形成多酶复合体 多功能酶：一条多肽链具有多种催化功能 米氏常数Km的意义 重要特征物理常数，与酶浓度无关。不同的酶具有不同Km值 物理意义：Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 Km值只是在固定的底物，一定的温度和pH条件下，一定的缓冲体系中测定的，不同条件下具有不同的Km值。 Km值近似等于[ES]的解离常数，可表示酶与底物之间的亲和力：Km值大表示亲和程度小，酶的催化活性低; Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高 酶工程简介 一、化学酶工程 （一）天然酶的合理应用 酶类在医药、食品、科研、化工领域的应用及新酶制剂的开发。 （二）化学修饰酶 酶功能基的化学修饰，如酰化反应修饰天冬酰胺酶（抗白血病）可提高其稳定性。修饰α胰凝乳蛋白酶的表面氨基，增强其亲水性，可提高其热稳定性；交联反应，如α半乳糖苷酶A经交联修饰后稳定性增强；大分子修饰作用，如用葡聚糖修饰α淀粉酶，用聚乙二醇修饰天冬酰胺酶，用肝素、葡聚糖或聚乙二醇修饰尿激酶均可提高其热稳定性。 （三）固定化酶 吸附法；偶联法；交联法；包埋法；固定化细胞；酶电极和传感器。 （四）人工模拟酶 以β环糊精为基础制成的胰凝乳蛋白酶人工模拟酶催化效率与天然酶相似，稳定性较天然酶好。 二、生物酶工程 （一）用基因工程生产酶 已有200多种酶的基因克隆成功，有一些可以高效表达，尿激酶原等已投入生产。 （二）用蛋白质工程改造酶 用蛋白质工程改造酶，可以改变酶的催化活性、底物专一性、调节功能、对辅酶的要求，可以提高酶的稳定性。 （三）设计新的酶基因，合成自然界不曾有的新酶 已有明显进展，有广阔的发展前景。 4.2 微生物的营养 4.2.1 微生物的化学组成 水分(70～90％)+干物质(30～10%) 有机物(90～97%):蛋白质、核酸、糖类和脂类 干物质 无机物(10～3%):P、S等和Cu、Mn等微量元素 C、H、O、N是所有生物体的有机元素 糖类和脂类：C、H、O 蛋白质：C、H、O、N、S 核酸：C、H、O、N、P 4.2.2 微生物的营养物 1. 水 有助于营养物质的溶解和吸收；保证细胞内外各种生化反应在溶液中正常进行；控制细胞内的温度。 2. 碳源和能源 碳源的作用是构成微生物细胞的含碳物质(碳架)和供给微生物生长、繁殖及运动所需要的能量。 ☆ 微生物最好的碳源是糖，尤其是葡萄糖、蔗糖。 3. 氮源 氮源的作用是提供微生物合成蛋白质的原料。 根据对氮源要求不同，微生物可分4类