Q Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统对丹皮酚经大鼠肝微粒体体外代谢产物的分析.pdfVIP

第4l卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第7期 2013年7月 ChineseJournalof Chemistry 1074—1079 Analytical QExactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统 对丹皮酚经大鼠肝微粒体体外代谢产物的分析 郭延垒1 吴明军1 李文娟1 江峥2 叶芳挺2 于超“ (重庆医科大学生命科学研究院，重庆400016)2(赛默飞世尔科技上海示范中心，上海201206) Exactive四极杆．静电场轨道阱高分辨质谱系统， 摘要以丹皮酚和2，4．二羟基苯乙酮为研究对象，采用Q 及内置有I相和Ⅱ相代谢途径分析的MetWorks代谢物鉴定软件，系统分析丹皮酚经肝微粒体代谢的I相代 谢及其I相代谢产物2，4一二羟基苯乙酮经微粒体代谢的Ⅱ相代谢产物。结果表明，丹皮酚在大鼠肝微粒体 中经I相代谢后产物主要为4位去甲基化的2，4-二羟基苯乙酮和l位相邻羰基的脱甲基化的2一羟基4一甲氧 基苯甲醛以及5位的羟基化代谢产物2，5一二羟基4-甲氧基苯乙酮，而2，4-二羟基苯乙酮的Ⅱ相代谢产物主 要为4位葡萄糖醛酸化的糖苷化代谢产物2-羟基-4-O一葡萄糖醛酸苯乙酮。 Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统 关键词丹皮酚；2，4-二羟基苯乙酮；大鼠肝微粒体；Q 1 引 言 随着药物代谢研究的不断深人，具有高分辨率、高灵敏度、高采集速度等特点的质谱系统在药物代 谢研究中的应用不断扩展¨’2j，因此越来越多的小分子代谢产物被发现。由于具有药理活性的小分子代谢 产物在早期ADME(药物吸收、分布、代谢和排泄)过程中同样发挥重要作用，因此受到广泛关注。 丹皮酚(Paeonol，Pae)，又称牡丹酚，主要是从萝摩科植物徐长卿Cynanchum Andr．、芍药P Pall的根 suffruticosa lactiflora Kitagawa干燥根或全草和毛茛科芍药属植物牡丹Paeonia 皮中提取分离出来的一种小分子酚类化合物，呈白色针状结晶，其分子量为166．17，化学名称为2-羟基一 4一甲氧基．苯乙酮。该活性物质具有抗菌、消炎、抗动脉粥样硬化、增强细胞免疫等广泛的药理活性¨1。 研究表明，丹皮酚在体内及体外有多种代谢产物，且多为I相代谢产物H’5J，其中最主要的是2，4一二羟 应产物]。但是，对于作为重要I相代谢中间体的2，4一二羟基苯乙酮是否存在Ⅱ相代谢途径的研究却 鲜有报道。 本实验采用先进的QExactive四极杆．静电场轨道阱高分辨质谱系统旧1，对丹皮酚经鼠肝微粒体 据一级和二级高分辨质谱数据对可能的代谢产物进行鉴定。同时借助MetWorks代谢鉴定软件内置的 Exactive采集的高分辨质谱数据进行进一步分析，根据精确质量 I相和Ⅱ相代谢途径分析功能，对Q 数、同位素分布、二级质谱图相关性等对可能的代谢物进行定性分析，极大地简化了数据处理流程。通 过分析确定了丹皮酚的代谢中间体在体外经肝微粒体的Ⅱ相代谢途径，并发现了一些新的代谢产物，为 丹皮酚体外代谢的进一步研究以及临床合理化用药提供新的实验依据。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 ThermoScientific Accela QExactive四极杆一静电场轨道阱高分辨质谱系统，Thermo600快速液相色 谱系统，MetWorks代谢产物软件分析系统(美国Thermo 2012-09-26收稿；2013-03-27接受 }E—mail：yuchaom@163．com 郭延垒等：QExactive四极杆一静电场轨道阱高分辨质谱系统对 第7期