遗传实验课件.ppt

遗 传 学 实 验 考核 各档成绩百分比： 平时占：20% 期末占：20% 实验占：60% 实验一、大蒜根尖有丝分裂染色体标本制备与观察 一、实验目的和要求 1.通过对植物根尖的制片和观察, 初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法； 2.了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式。 在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。植物根尖是有丝分裂最旺盛的部位，把根尖经过秋水仙素处理，固定，染色和压片，在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 1．材料：大蒜根尖 2．器具：载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、滴管、解剖针、吸水纸、小烧杯、培养箱、水浴锅、纱布 3．药品：改良品红染液、1N HCl 1．根尖培养及固定： 大蒜鳞基置于盛水的小烧杯上，25oC培养箱中培养，根长到2cm左右时，上午九时（分裂高峰期），剪取根尖，立即放在卡诺固定液中固定24小时，转入70%的酒精中，4oC保存。 目的：迅速渗入组织和细胞将之杀死，使其形态结构和内含物尽可能保持活时的完整和真实状态。 2．解离： 固定好的根尖，蒸馏水漂洗，放在1M HCl中，60oC水浴解离8-10分钟，蒸馏水漂洗（约10分钟）。 目的：使分生组织细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解，使细胞和染色体容易分散，压平。 3．染色与压片： 取一根尖置于载玻片上，用解剖针把根冠及延长区截去，滴加改良品红染液1-2滴，根尖着色后(约10分钟)，加盖片，用滤纸条在盖片处绕载玻片紧紧缠绕起来，大拇指轻按，再用铅笔的橡皮头适当用力敲打盖片，使染色体渐渐分散，去除滤纸条，吸干多余的染液。 4．镜检： 观察时先在低倍镜下找到分裂相，再用高倍镜观察。 五、作业 绘出所观察到的有丝分裂图象，并注明各时期。 实验二、植物多倍体人工诱导 一、目的和要求： 了解人工诱导多倍体的原理，并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法。 二、实验原理: 多倍体是指细胞内有三套或三套以上染色体组的生物体。多倍体广泛存在子植物界，有同源多倍体，也有异源多倍体。除了自然界中存在的多倍体外，还可以人工诱发多倍体，其中秋水仙素是效果最好的诱发剂。 秋水仙素作用机理是抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使复制后的染色体不能拉向两极，细胞不能继续分裂，从而导致染色体加倍，形成多倍体细胞。 三、材料、器具和药品： 1．材料： 大蒜 2．器具： 显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿 镊子、刀片、滴管、吸水纸。 3．药品： 0.1%和0.025%秋水仙素溶液 1MHCl，改良品红染液。 四、实验步骤： 1．培养：剪去老根，置于盛水的瓷盘中，当长出新的不定根后，用秋水仙素处理。 2．秋水仙素处理：把长出幼根的大蒜分成两组，一组移到０.01%-0.1%盛有秋水仙素溶液的瓷盘中，使植物根部浸在药液中，根尖朝下，25oC条件下处理，直到根尖明显膨大为止，另外一组作为对照，不加秋水仙素培养。 3．固定：取出大蒜，洗净，剪下根部，用卡诺固定液固定2-24小时。 4．解离：取出固定好的根尖，水漂洗２－３次，放在1NHCl中，60oC水浴解离8-10分钟，蒸馏水漂洗。 5．染色与压片：取一根尖置于载玻片上，用解剖针把根冠及延长区截去，滴加改良品红染液1-2滴，根尖着色后(约10分钟)，加盖片，用滤纸条在盖片处绕载玻片紧紧缠绕起来，大拇指轻按，再用铅笔的橡皮头适当用力敲打盖片，使染色体渐渐分散，去除滤纸条，吸干多余的染液。 6．镜检：在显微镜下观察用秋水仙素处理过的根尖与对照组根尖的染色体数目的差异。 作业: 绘制经秋水仙素处理后，四倍体细胞的中期染色体图像。 实验三、大葱花粉母细胞减数分裂染色体制备(涂片法)及观察 一、目的和要求 二、实验原理 1.减数分裂概念: 减数分裂是细胞仅进行一次DNA复制，随后进行两次分裂，染色体数目减半的一种特殊的有丝分裂，因此一个二倍体的性母细胞便形成为四个单倍体的性细胞。 2、减数分裂过程: 间期(前间期) 3.花粉发育过程： 三、材料、器具和试剂 1．材料：大葱花蕾（百合科（Liliaceae）葱属，学名Allium fistulosum L. ，2n=16） 2．器具：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、大培养皿、吸水纸。 3．药品：改良苯酚品红染液 四、实验步骤 1．取材与固定： 春季时摘取花序，固定液中固定24小时，70%酒精中备用； 2．剥