低氢氰酸含量高丹草新品系及其亲本的SSR分析.pdfVIP

第23卷第1期 草业 学 报 223——228 V01．23。No．1 ACTAPRATACULTURAESINICA 2014年2月 低氢氰酸含量高丹草新品系及其亲本的SSR分析 于卓+，谢锐，于肖夏，马艳红，李造哲，纪明妹 (内蒙古农业大学农学院，内蒙古呼和浩特010019) 苏丹草、白壳苏丹草、红壳苏丹草和棕壳苏丹草在DNA水平上的差异程度，以育成登记的高丹草品种蒙农青饲3 号为对照，对其进行了SSR分析。试验从200个高粱SSR引物中筛选出多态性丰富、重复性好的12对引物，利用 这些引物对10个材料进行PCR扩增共得到509个多态性位点，多态性百分率达87．30％。每对引物扩增的SSR 指纹图清晰、稳定，可作为鉴别4个高丹革新品系及其亲本的分子依据。10个供试材料间的遗传距离(GD)变幅在 为一类。该研究为下一步低氢氰酸含量高丹草新品种育成及登记利用奠定了基础。 关键词：高丹草；低氢氰酸含量；新品系；SSR分析；指纹图 中图分类号：$816}$544+．103文献标识码：A 文章编号：1004—5759(2014)01—0223—06 DOl：10．11686／cyx 高丹草是高粱(Sorghumbicolor)与苏丹草(Sorghum 逆性强和苏丹草叶量大、品质好等优良特性，其不足点是鲜草中含有氢氰酸口。]。有研究表明，高丹草品种间氢氰 酸含量差异较大。含量高的品种(株高约100cm时茎叶鲜草氢氰酸含量≥100mg／kg)家畜采食量大时会出现中 毒现象，给生产带来严重损失[4。6j。选育青刈饲喂安全的超低氢氰酸含量(株高约100cm时茎叶鲜草氢氰酸含量 1～15 mg／kg，青刈后可直接饲喂家畜)高丹草新品种是预防氢氰酸危害的有效措施。 为培育青刈饲喂家畜安全的超低氢氰酸含量高丹草新品种，近年来我们利用在内蒙古中西部地区种植多年 的氢氰酸含量低的散穗高粱与黑壳苏丹草、白壳苏丹草、红壳苏丹草和棕壳苏丹草相组配进行人工授粉杂交，获 (散穗高粱×棕壳苏丹草F。)[7‘1 sequence 0|。SSR(simplerepeats，简单重复序列)为共显性标记，具有多态性丰 富、重复性好等优点，已广泛应用于牧草和作物的遗传多样性分析、遗传图谱构建、基因定位及分子标记辅助育 们育成登记的高丹草品种蒙农青饲3号为对照[15I，重点对上述4个高丹草新品系及其亲本进行SSR分析，以明 确其在DNA水平上的差异程度，并建立高丹草新品系的SSR指纹图，为下一步高丹草新品种育成及登记利用提 供科学依据。 1材料与方法 1．1试验材料 草、白壳苏丹草、红壳苏丹草、棕壳苏丹草，对照品种为蒙农青饲3号高丹草(Sorghum SU一 收稿日期；2013—08—19；改回日期：2013-10—30 作者简介：于卓(1958一)，男，内蒙古托克托人，教授，博士。 *通讯作者。E—mail：yuzhu058@sina．corn ACTAPRATACUI。TURAESINICA(2014) V01．23，No．1 danense No．3)。各供试材料的种子由内蒙古农业大学农学院饲用作物育种研究室提供， ev．MengnongQingsi 试验于2012年7月至2013年5月在室内进行。 1．2 总DNA提取与纯度检测 将各供试材料的种子播种在花盆中，室温条件下培养成苗，在三叶期每种材料随机剪取20个单株幼苗的叶 DNA用1．5％琼脂糖凝胶电泳 片混合，用植物基因组试剂盒(北京天根生化科技有限公司)提取DNA，取5弘L 检测DNA纯度，将各材料的DNA浓度稀释至50 ng／pL置冰箱中冷冻保存备用。 1．3 SSR-PCR扩增反应