分子生物学I.PDFVIP

分 子 生 物 学 I 生 物 化 学 — 研 究 生 物 体 内 的 单 一要 素 遗传 学 — 研 究 生 物 体 内 欠 缺 该要 素 时 的 情 形 生 化 遗传 学 ： 以 精 胺 酸(Arginine)生 物 合 成 过程 为 例 ： A B C X Y Z 精 胺 酸(Arginine) 中 间产 物 ： Y， Z ； 酵素 ：A ， B， C 此 过程 有 三 个 步 骤， 涉 及 两 个 中 间产 物 的 产 生 ， 直 到 最后 转变 为 精 胺 酸， 总 共 有 三 种 酵素 催 化 各 个 转变 过程 ， 包 括 A、 B 、 C （各 由 基 因 A、 B、 C所 调 控 ） 。 三 个 步 骤中 任 何 一个 步 骤出 现 缺 陷都会 影 响 精 胺 酸的 正 常 合 成 过程 ， 如 果 让精 胺 酸 合 成 过程 中 的 其 中 一步 骤出 现 缺 陷， 将 精 胺 酸加 到 培 养 皿 中 ， 则 所 有 精 胺 酸突 变 菌 株 （即 无 法 正 常 合 成 精 胺 酸的 菌株 ） 都必 须在 特 定 条 件 下 才 能 生 存 。 给 定 一组 精 胺 酸突 变 菌株 （arg mutant ） ，透 过检 测 菌株 的 生 长 状 况 和 中 间产 物 的 累 积 量来 决 定 突 变 株 的 突 变 情 形 。 各 突 变 株 中 精 胺 酸合 成 过程 的 突 变 情 形 ： A B C X Y Z 精 胺 酸(Arginine) 突 变 株 Arg1 ╳ 注 ：Arg1代 表gene A发 生 突 变 Arg3 ╳ 注 ：Arg3代 表gene B发 生 突 变 Arg5 ╳ 注 ：Arg5代 表gene C发 生 突 变 Arg1/ Arg3 ╳ ╳ 注 ： 双 重突 变 株 ， gene A和 B 突 变 上 位 显 性 测 试 （Tests of Epistasis ） 「上 位 显 性 」 是 指 某 一基 因 的 表现 会 抑 制 与 之 相 关 的 另 一基 因 的 表现 的 情 形 。 透 过突 变 株 ， 我 们 可 以 获得 精 胺 酸合 成 过程 中 的 中 间产 物 ， 并 能 够 决 定 菌株 的 生 长 条 件 为 何 ， 由这些 信 息 可 以 决 定 合 成 过程 中 相 关 基 因 的 参 与 顺序 （如 果 事 先 仍 不 知 顺序 ） 。 各 菌株 在 下 列 条 件 下 的 生 长 情 形 ： （生 长 于 仅 带 有 最低 营 养 限度 的 培 养 皿 中 ） A B C X Y Z 精 胺 酸(Arginine) wt （正 常 菌株 ） ＋ ＋ ＋ ＋ Arg1 ─ ＋ ＋ ＋ Arg3 ─ ─ ＋ ＋ Arg5 ─ ─ — ＋ Arg1/ Arg3 — — ＋ ＋ ※ “＋ ” 代 表有 生 长 ， “ － ” 代 表没 有 生 长 。 Arg1/ Arg3为 带 有 两 种 突 变 基 因 的 菌 株 。 结 果 解读： 举 例 来 说， 由 于 基 因 Ａ 发 生 突 变 ， 造 成 酵素 Ａ无 法 正 常 产 生 ， 使 Arg1突 变 株 无 法 在 最低 营 养 限度 的 培 养 皿 中 生 长 。 Arg1突 变 菌株 只 有 在 加 入 中 间产 物 Ｙ 、 Ｚ 到 培 养 皿 时 才