实验二 免疫组织化学技术.pptVIP

阴性对照切片-，阳性对照标本和待检测切片呈弱阳性 原因： 标本固定不当 抗体试剂问题：浓度、效价低 抗原修复不当 显色时间短 免疫病理学技术在科研及临床中的运用 免疫病理学 一、免疫细胞化学 二、免疫组织化学 三、免疫荧光组织化学 一、免疫细胞化学 1、定义：利用已知抗体检测细胞爬片上细胞是否存在相应的抗原。 2、原理：抗体+细胞抗原----显色 3、运用：检测相关基因的表达 二、免疫组织化学Immunohistochemistry, IHC 原 理 用 途 试剂配置 操作步骤 ＋ 标记抗体 标记的抗原抗体复合物 免疫组织化学反应原理 组织抗原 1 荧光素 2 酶标 3 金属离子 4 同位素 HPR-DAB显色呈棕黄色 间接法:灵敏性 三步法、两步法 直接法：特异性 一步法 两种免疫组织化学反应方法 亲和素-生物素方法（三步法）：ABC、SP法 多聚螯合物酶法（两步法）：Supervision法 用 途 临床病理诊断：肿瘤分类诊断 上皮来源：CK，EMA 间叶来源：Vimentin 淋巴组织: LCA 科研：组织抗原表达情况 试剂准备 切片(防脱片) 多聚赖氨酸, APES 一抗 多抗or单抗,兔or鼠, 注意种属特异性，针对检测组织种属 检测试剂盒 EliVisionTM plus 检测试剂盒（