分子印迹整体柱在色谱分离中的应用.docVIP

附录二：译文1 分子印迹整体柱在色谱分离中的应用 摘要 分子印迹整体柱是二十世纪九十年代兴起的一种新型分离柱，典型的整体柱材料无须通过烦琐的研磨、筛分、装柱等程序而可以直接在不锈钢柱或毛细管中制备。此外，分子印迹聚合物的制备，由于模板分子的使用量相对较少，使其更为经济。近年来，整体柱以其制备简单、重现性好、用途广泛、传质速度快等优点引起人们的广泛关注。它常作为高效液相色谱和电色谱的固定相。 关键词 液相色谱柱 毛细管电色谱 整体柱 分子印迹聚合物 引言 分子印迹技术是制备具有特殊分子识别性能的固定相的有效方法。分子印迹的原理是聚合过程中通过使用交联剂将功能单体和目标分子或模板分子混合物聚合。从功能基团中移除模板分子，它原来的位置处便会分布着键合位点，因此分子印迹聚合物具备了选择性识别与模板分子结构相似分子的能力。分子印迹聚合物不仅有高机械强度、耐高压力、高温，同时在酸、碱、有机溶剂、有金属离子存在下能保持稳定。分子印迹聚合物在生物聚合物方面表现出低损耗、高物理和化学稳定性等特点。在分析化学中，分子印迹聚合物常用于固相萃取、配体键合测定、传感器、色谱。 分子印迹聚合物可以制成多种形状应用于色谱。传统方法是合成大块的分子印迹聚合物，通过研磨、筛分得到所需要的颗粒。色谱研究中常用颗粒的尺寸应小于25微米。将磨碎的且筛分好的颗粒装入到传统的高效液相色谱柱中，或固定于薄层色谱板上；另外，通过使用丙烯凝胶硅酸盐母株，也可将颗粒捕集到毛细管色谱柱中。虽然块状聚合相对简单，印迹条件的优化也较容易，然而研磨和筛分步骤较为烦琐，只有一部分聚合物能作为填装料被利用。由于磨碎的颗粒在形状和尺寸上具有多分散性，限制了其使用效率和分离度。聚苯乙烯树脂常作为模板材料，通过两步的溶胀种子聚合技术合成分子印迹聚合物。虽然通过该方法所获得的分子印迹聚合物颗粒在形状和尺寸上相对单一，能很好的应用于色谱，然而水性乳化剂会干扰印迹过程，因此颗粒的选择性能不是很理想。为避免这种干扰，研究了在碳氟化合物溶剂中的情况。通过该方法制备的聚合物颗粒不仅表现出良好的色谱分离性能，而且在高流速下能表现出很好的分离选择性，但是特殊的碳氟化合物和氟化表面活性剂限制了该方法在实际中的应用。 最近，Ye et al.用沉淀聚合法来制备分子印迹微球体，尽管有很高的产率，在实验中由于大的稀释效应，需要大量的模板分子。 为了简化实验制备步骤，Matsui et al.首先使用原位聚合技术来制备分子印迹整体柱，与传统方法相比，过程相对简便，而且制备的整体柱的大孔结构具备良好的通透性。通过使用该技术合成的分子印迹整体柱可以避免烦琐的研磨、筛分、装柱等过程，并且可以直接在不锈钢柱或毛细管柱中进行合成。此外，这种制备分子印迹聚合物的方法效率较高，模板分子需求的量较少。 整体柱 整体柱作为一种分离介质，在形式上可以看成是一个大的“颗粒”，但没有典型的填充床的颗粒间的孔隙结构。 首次制备单相分离媒介始于二十世纪六十年代晚期、二十世纪七十年代早期。他们在柱中通过单体聚合来合成整体柱。其制备过程比填充柱灵活，可以使用的单体更为广泛，在制备整体柱时可使用其完整的结构，这些结构具有的外部孔隙比紧密填充颗粒好多。具备高透气性的整体柱必定具备高渗透性和低压力降等特性。近年来整体柱以其制备简单、重现性好、用途广泛、传质速度快等优点引起人们的关注。它常作为高效液相色谱和电色谱的固定相。固定相中存在的大孔结构使流动相在高流速下受到很小的阻力。此时液相在孔隙中流动的机理是对流过程，它的速度远比传统固定相中扩散机理的速度要快。大量文献都报道了使用这种固定相能起到快速分离的效果，近年来固定相整体柱技术在色谱固定相制备领域得到了快速的发展有些技术还得以商业化。有些色谱研究员把整体柱看成第四代色谱分离介质。 分子印迹聚合物的发展和应用 在高效液相中的发展和应用 1993年，Matsui et al.用原位聚合方法来制备毛细管整体柱，将模板分子和引发剂加入到功能单体（甲基丙烯酸或2-三氟甲基丙烯酸），交联剂（乙烯，乙二醇，二甲基丙烯），极性溶剂（环己烷和1-十二烷酸）混合液中，搅匀，注入到干净的钢柱中，聚合反应在水浴中进行。当聚合完毕，用甲醇、醋酸混合液彻底洗去模板分子和极性溶剂。将L或D形的苯基苯胺作为制备分子印迹聚合物整体柱的模板分子，该整体柱可以将苯基苯胺对映异构体区分开，因此只需简单的步骤就能使整体柱具备合适的选择性，然而它却表现出低分离度，这可能是因为原位制备过程中使用了1-十二烷醇和环己醇作为致孔剂，它们严重干扰了氢键，在印迹过程中，通过静电作用影响模板分子和功能单体的作用。 Sellergren 在15cm长，5mm内径的玻璃管中通过分散聚合制备多孔MIP，这种方法是将微尺寸的球状颗粒聚集于柱中。异丙醇水溶液作为