农产品质量安全与检测课件.pptVIP

快速检测仪器和设备 快速检测仪器和设备（卡片法） 快速检测仪器和设备（酶抑制率法） 结果打印口 机身 显示屏 操作按键 样品槽 快速检测仪器和设备（酶抑制率法） 比色皿 速测仪的种类 速测仪的种类按一次可测定的数量分可分为三类： ——八通道以下的，即一次最多可测定七个样品。大部分厂家的仪器都属于这一类； ——大于8通道小于80通道的，目前有12通道和36通道的； ——80通道以上，即一次可测定80个以上样品。 速测仪的种类 从仪器分光结构上可分为二类： ——分光装置使用滤光片； ——分光装置使用光电二极管。 建议使用分光装置使用滤光片的仪器。 试 剂 提取试剂： p H = 8 缓冲液 胆碱酯酶：乙酰胆碱酯酶或丁酰胆碱酯酶 显色剂： 二硫代二硝基苯甲酸(DTNB) 底物：碘化硫代乙酰胆碱(ATCI) 或碘化硫代丁酰胆碱(B TCI) 蔬菜农药残留快速检测流程图 取样（叶菜类2克，非叶菜类4克），切碎 ? 加入20毫升提取试剂，震荡1-2分钟 于平底小试管中加入50微升酶、3毫升样本提取液、50微升显色剂在37~38℃下培养30分钟 ? 于待测的5只平底小试管内分别加入50微升底物分别倒入5只比色皿中，放入仪器进行测定 注：对照组的比色皿中用3毫升提取试剂代替样本提取液 结果计算 抑制率（%）= 抑制率：酶被抑制的程度 △A c :对照组3min 后与3min 前吸光值之差; △A s :样本3min 后与3min 前吸光值之差。 检测结果判断标准 乙酰胆碱酯酶（国标） 检测结果以抑制率（%）表示 抑制率50% 阴性 合格； 抑制率≥50% 阳性 至少两次以上重复 检测 不合格 用GC进一步定性定量分析。 检测结果判断标准 丁酰胆碱酯酶（农业部行标） 检测结果以抑制率（%）表示 抑制率70% 阴性 合格； 抑制率≥70% 阳性 至少两次以上重复、 检测 不合格 用GC进一步定性定量分析。 样本检测 阴性 阳性 复测（两次以上） 阴性 阳性 仪器分析 根据市场规定处理 六 、农药残留快速检测中注意事项 采样要求 样品制备 试剂的配制与保存 检测过程 解释检测结果的异常现象 采样要求 随机抽取摊位上各部位的蔬菜, 每种样本至少取0.5～1kg左右, 要求具有代表性。 抽检样本要详细记录。如蔬菜种类、抽检地点、时间、蔬菜来源、批发商等，保证可追溯性。 样品制备 选取包含大、中、小个体具有代表性的蔬菜，擦净表面泥土，用取样器取样或剪成1cm见方碎片，待用。 叶菜、普通油菜：用取样器从叶片部位取样，称取2g测定 花椰菜和青花菜：取花球部分，切成小块，称取2g测定 大白菜、甘蓝、球生菜：选取3至5棵菜，用取样器从蔬菜对称位置从表面穿至1-1.5cm处取样，混合均匀，称取2g测定 茶青：选取3-5株鲜叶，直接于提取液中浸泡，不能破碎叶片，避免导致叶绿素造成假阳性 样品制备 果菜（番茄、茄子、辣椒）和瓜类（黄瓜、西葫芦）菜：从果实对称部位取果皮，切成见方小块，称取4g测定 豆类菜（包括：菜豆、豇豆、荷兰豆等）：选取多根菜豆，从中截取一段，再切成小段，混匀，称取4g测定 试剂的配制与保存 酶的要求 底物与显色剂 酶的要求 选择对国内常用的有机磷和氨基甲酸酯类农药较敏感以及活性高的胆碱酯酶。 以3min后与3min 前空白吸光值的差值即△Ac在0.4～0.8之间为佳（国标为0.3以上）。 如果空白△Ac低线以下,可适当加大酶的加入量，或减少溶解酶的缓冲液。 粉状的酶应储存在冷冻室内,用缓冲液溶解后应储存在0℃～5℃冷藏室内,在一周内用完；溶后暂时不用的酶要保存在冷冻室内,用时解冻,解冻后一周内用光,不要反复解冻,否则会影响酶的活性。 底物与显色剂 加入10.0mL缓冲液至试剂瓶中，摇匀， 储存于冷藏室中。 在使用过程中避免交叉污染，观察试剂颜色是否正常。 检测过程 使用移液枪时，避免溶液吸空或推液不尽导致所取溶液体积不准，造成数据不准确 反应温度、反应时间对酶抑制率的影响 温度对酶的活性和稳定性影响很大，因此实验必须在恒温条件下进行，使空白和样品的反应温度一致，避免实验误差 农产品质量安全与检测 目录 一、 前言 二、 农药残留基本知识概述 三、 标准的认识与应用 四 、检测技术的基本原则与操作的一般要求 五 、农药残留快速检测技术概述 六 、农药残留快速检测中注意事项 七、 如何避免漏检和“假阳性”样品的出现 八、 样品的采集及制备 一、前言 农产品质量安全的内涵 广义： 农产品数量保障和质量安