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学高中生物第章无菌操作技术实践第节分离特定的微生物并测定其数量课件
知识点一
知识点二
当堂即时达标
微 生 物 的 分 离
选择
固体
单个菌落
混合平板
固体
选择培养
抑制
菌落
固体
形态结构
生长群体
形状
颜色
分类
比较
操作
特点
结果
涂布
平板法
取一定稀释度的样品涂布平板
↓
用无菌玻璃刮铲将样品涂布均匀
先制作琼脂平板后加入菌液
细菌菌落通常仅在平板表面生长
混合
平板法
取一定稀释度的样品与熔化的琼脂混合
↓
将与样品混合后的琼脂倒入无菌培养皿
菌液与琼脂混合,共同倒平板
细菌菌落出现在平板表面及内部
比较方面
平板划线法
稀释涂布平板法
①
需在无菌条件下操作
不需无菌操作
②
培养基中不加琼脂
培养基中加有琼脂
③
不可计算菌液中的活菌数
可计算菌液中的活菌数
④
需要接种环
需要玻璃刮铲
编号
成分
含量
①
KH2PO4
1.4 g
②
Na2HPO4
2.1 g
③
MgSO4·7H2O
0.2 g
④
葡萄糖
10.0 g
⑤
尿素
1.0 g
⑥
琼脂
15.0 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL
土 壤 微 生 物 的 分 离 、 培 养 与 数 量 测 定
稀释倍数
血球计数板
载玻片
25
400
盖玻片
毛细滴管
5
稀释倍数
纤维素
土壤悬液
接种培养
项目
直接计数法
间接计数法
主要
用具
显微镜、细菌计数板
培养基
计数
依据
菌株本身
培养基上菌落数
优点
计数方便、操作简单
计数的是活菌
缺点
死菌、活菌都计算在内
操作较复杂,且有一定误差
计算
公式
每毫升原液含菌株数=400×104×每小格平均菌株数×稀释倍数
每毫升原液含菌株数=培养基上平均菌落数×稀释倍数(涂布所用稀释液为1 mL)
网络构建
核心回扣
1.实验室中分离微生物的方法有平板分离法和选择培养分离,平板分离法常用的有涂布平板法和混合平板法。
2.针对某种微生物的特性,设计一个特定的环境,使之特别适合这种微生物的生长,而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。
3.测定微生物数量的常用方法有涂布平板法和显微镜直接计数法。涂布平板法计数的结果与待测样品中真正的含菌数量相比往往偏低。
4.涂布平板法培养和计数微生物的流程为:准备实验器材→采集土壤,制备悬液→选择适于分离特定微生物的培养基→接种→培养与观察→计数菌落。
5.涂布平板法计数微生物的公式:每克土壤样品的细菌数=某一稀释度几次重复培养后的菌落平均数×稀释倍数(涂布所用稀释液为1 mL)
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