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常用抗菌药物抑杀菌活性检测与评价课件
2.3各种药品对白色葡萄球菌的抑菌圈结果示意图 链霉素 氨苄青霉素 卡那霉素 两种中药 Tankertanker Design Tankertanker Design Tankertanker Design Tankertanker Design Tankertanker Design Tankertanker Design 微生物学 综合性设计实验 ——常用抗菌药物的抑杀菌活性检测与评价 汇报人:第三组 成员名单: 目录 CONTENTS 实验目的及原理 实验设计思路 实验步骤 实验结果 分析讨论 实验目的 通过实验培养学生自主设计实验的能力 1 巩固已学习的微生物实验技能,学以致用 2 培养学生的团队合作意识 3 培养学生总结实验结果和撰写科研论文的能力 4 抗生素 1 中药复方抗菌类药物 2 实验原理 抗 生 素 抗生素是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)产生、能抑制或杀灭其他微生物的物质。抗生素既不参与细胞结构,也不是细胞内的贮存性养料,对产生菌本身无害,但对某些微生物有拮抗作用,是微生物在种间竞争中战胜其他微生物保存自己的一种防卫机制。 Firefly Series 实验原理 天然品 人工合成品 微生物 对天然抗生素进行结构改造获得的部分合成产品 ——抗生素的特点 实验原理 2 抗生素的作用具有选择性,不同抗生素对不同病原菌的作用不一样。对某种抗生素敏感的病原菌种类称为该抗生素的抗生谱(抗菌谱)。 广谱抗生素对多种病原菌有抗生作用,例如青霉素对多种革兰氏阳性细菌都有良好药效,链霉素对多种革兰氏阳性和阴性细菌都有良好药效,对结核杆菌有特殊的疗效。 ——抗生素的特点 实验原理 3 有效作用浓度。各种抗生素一般都在很低浓度下对病原菌就发生作用,这是抗生素区别于其他化学杀菌剂的又一主要特点。 各种抗生素对不同微生物的有效浓度各异,通常以抑制微生物生长的最低浓度作为抗生素的抗菌强度,简称有效浓度 。 有效浓度越低,表明抗菌作用越强。 ——抗生素的作用机制 实验原理 ①抑制细胞壁合成(青霉素、头孢菌素 、杆菌肽 ); ②干扰细胞膜(多粘菌素); ③抑制蛋白质合成(与50S(30S)核糖体结合,氯霉素, 红霉素); ④抑制DNA复制(丝裂霉素); ⑤抑制RNA转录或合成(放线菌素D、利福平)。 实验原理 抗生素分解或失去活性 抗拒药物的靶点发生变化 细胞特性的改变 细菌产生药泵将进入细胞的抗生素泵出细胞 ——细菌对抗生素(包括抗菌药物)的抗药性的4种机制 双黄连 一种理想的抗病毒及细菌感染的中药新剂型,清热解毒 用于风热感冒发热,咳嗽,咽痛 实验原理 ——传统中药的抗菌活性 (金银花、黄芩、连翘) 清热解毒口服液 感冒类非处方药药品,清热解毒 用于热毒壅盛所致发热面赤,烦躁口渴,咽喉肿痛等症;流感、上呼吸道感染等 实验原理 ——传统中药的抗菌活性 (含有石膏 、知母 、金银花、 连翘 、黄芩、 栀子、 龙胆、 板蓝根 、 甜地丁、玄参 、地黄 、麦冬) 实验原理 ——检测化学抑杀菌剂的作用活性的方法 实验设计思路 明确实验目的、原理 联系原有知识形成各种思路 评价各种思路 选择最优思路 确定总方案 实验设计思路 大肠杆菌、白色葡萄球菌 双黄连、清热解毒口服液 链霉素、氨苄青霉素、卡那霉素 二倍浓度稀释法 菌种 浓度 药品 实验仪器试剂材料 链霉素、氨苄青霉素、卡那霉素药液,初始浓度均为100μg/mL 双黄连口服液、清热解毒口服液药品原液,未经稀释。 实验菌种:大肠杆菌(G-),白色葡萄球菌(G+) 高压蒸汽灭菌锅,超净工作台,恒温培养箱,微波炉。 氢氧化钠溶液、盐酸,浓度均为1mol/L;牛肉膏蛋白胨培养基 滤纸片200个(直径6mm) ,牛津杯(100个),培养皿(60个),试管及试管塞(20套),移液枪和移液管,离心管,涂布棒,酒精灯,镊子,pH试纸,接种环 实验步骤 ⒈配制牛肉膏蛋白胨培养基 ⒉打孔器打出直径6mm的圆形小滤纸片,约200张;制备生理盐 水;将 牛津杯、枪头盒以及上述实验材料包扎好,于高压蒸汽灭菌 锅内121℃ 下灭菌 0.75mL 0.75mL 0.75mL 0.75ml无菌生理盐水 0.75mL 药品原液(100μg/mL) ⒊对三种抗生 素进行二倍稀释,配制出浓度为50μg/mL,25μg/mL,12.5μg/mL,6.25μg/mL的药品稀释液。 实验步骤 0.5mL 0.5mL 0.5mL 0.5mL 4.5ml无菌生理盐水
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