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标 记 免 疫 技 术 邹全明 第三军医大学医学检验系 临床微生物学和免疫学教研室;标记免疫技术=;标记免疫技术;第一节 酶免疫技术 ; 基本特点： ①标记后保留酶和抗原(抗体)的活性。 ②酶促反应专一性，保证特异性。 ③底物反应放大作用，提高敏感性。 ④酶标试剂保存稳定。 ⑤操作简便，安全易行。 ;二、酶免疫技术的技术要点 ;种类与选择 1.塑料制品 2.微颗粒 3.膜载体;（二）酶与酶作用底物;2. 常用酶及其底物 （1）辣根过氧化物酶（HRP） 常用底物： 邻苯二胺（OPD）：反应显橙黄色，应避光，致癌性。 四甲基联苯胺（TMB）：反应后呈蓝色，无需避光，无致癌性，但水溶性差。 ;（2） 碱性磷酸酶（AP） 常用底物为对硝基苯磷酸酯（p-NPP），产物为黄色。 * AP灵敏性高与HRP，但不易获得纯品，稳定性及酶标记物收率 低于HRP，且价高，故应用不如HRP普及。 ;（三）酶标记抗体或抗原 基本要求： 酶标记抗原纯度要高，抗原性完整；抗体的特异性好，效价高，亲和力强，比活性高以及易于批量生产和分离纯化。;酶标记方法 1.交联法 以双功能交联剂为“桥”，分别与酶和抗体（抗原）连接形成结合物。如戊二醛交联法。 2.直接法 用过碘酸钠活化酶蛋白