第十四章:免疫学检测技术
;主要内容;一、Ag或Ab检测;1.特异性和交叉反应
特异性:一种抗原通常仅能与由它刺激所产生的抗体结合。
分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性。
;交叉反应(cross reaction)性:若两种抗原分子有一个或数个相同(或相似)的决定基,则针对一种抗原的抗血清可与另一种抗原发生反应。;比例合适:
若抗原、抗体的数量比例合适,抗体分子的两个Fab段分别与两个抗原决定基结合,相互交叉连接成网格状复合体,则反应体系中基本不存在游离的抗原或抗体,此时形成肉眼可见的反应物(沉淀物或凝集物)。
因此,确定反应体系中抗原、抗体的最适比例十分重要。
前带现象(prozone)和后带现象(postzone)
Ab过剩和Ag过剩 ;前带现象(prozone)和后带现象(postzone)
Ab过剩和Ag过剩 ;网格学说(lattice theory); 抗原-抗体反应为分子表面的非共价结合,结合???稳定但可逆。在一定条件下(如低pH、高浓度盐、冻融等),抗原-抗体复合物可被解离。解离后的抗原和抗体仍保持原有理化特性和生物学活性。
根据此特点,可借助亲和层析法纯化抗原或抗体。;4.阶段性;1.电解质
抗原和抗体有对应的极性基团,能相互吸附并由亲水性变为疏水性。电解质的存在使抗原-抗体复合物失去电荷而凝聚,出现可见反应,故免疫学试验中多用生理
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