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枯草芽孢杆菌sacb基因的功能验证及应用-核农学报
590 核 农 学 报 2008 ,22 (5) :590~594
J ournal of N uclear Agricultural Sciences
( )
文章编号 2008 0559005
枯草芽孢杆菌 sacB 基因的功能验证及应用
1 1 ,2 1 1 1
吴 菁 刘秀敏 张 维 陈 明 林 敏
( 1 中国农业科学院生物技术研究所 ,北京 100081 ;2 河北交通职业技术学院 ,河北 石家庄 050091)
( )
摘 要 :本研究将枯草芽孢杆菌 B acillus subtilis 基因组 DNA 中克隆的 14 kb sacB 基因片段连接到表达
载体 p ET28a ( + ) ,构建了 sacB 基因表达载体 p SacB 。通过测定蔗糖水解产生的葡萄糖具有的还原性 ,
( )
确定 sacB 基因产物具有蔗糖果聚糖酶活性 。该基因表达后 ,导致大肠杆菌 Escherichia coli 细胞不能在
含 5 %蔗糖的培养基中生存 。同时发现 sacB 基因也能赋予耐辐射菌株Deinococcus sp . BR501 蔗糖敏感
性 。利用条件致死 sacB 基因的这一特性 ,我们分析了 D . sp . BR501 的突变率 ,结果表明DNA 错配修复
(Δ )
缺失突变株 mutS 1 的突变频率明显高于野生型 。因此枯草芽孢杆菌 sacB 基因可作为验证 DNA 损伤
修复能力的一种筛选标记 。
关键词 :枯草芽孢杆菌 ; sacB 基因;蔗糖果聚糖酶 ;突变率
FUNCTIONAL IDENTIFICATION OF Bacillus subtilis sacb GENE AND ITS APPLICATION
WU Jing L IU Xiumin ZHAN G Wei CHEN Ming L IN Min
( 1 B iotechnology Research Institute , Chinese Academy of Agricultural Sciences , Beij ing 100081 ;
2Hebei J iaotong Vocational Technical College , Shij iazhuang , Hebei 050091)
Abstract :In this study
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