箬竹叶中黄酮类化合物的高效液相色谱分析f.pdfVIP

、 维普资讯 … 报 第 2期 月 mistry 2L6～ 219 箬竹叶中黄酮类化合物的高效液相色谱分析 f)“ 6—2， 邹耀洪 (江苏常熟高等专科学校化学幕，常熟 215500) A 摘 要 用高效液相色谱法 ，以苯基柱为固定相 ，甲醇 ·水为流动相，并应用二极管阵列检测 技术，分离和制备了箬竹 叶中8种黄酮类化台物，经结构鉴定 ，确证 6种为结构相近的黄酮甙 类化台物，并以其中的芦丁为标准 ，测定了 8种黄酮类化合物在簪竹 叶中的含量 。 关键词 篓 !旦，重堕类化合物，壹塑堕塑皇堂法 1 引 言 我国南方丘陵地区广为分布的箬竹的竹叶具有一定的医药功能和防腐保鲜作用。 用其 包裹的米粽清香而又耐贮存 ”。这与其台有的黄酮类化台物的抗氧化作用有关 。黄酮类化合 物具有多方面的化学活性 “，分析植物中的黄酮类成分是当前植物化学重要的研究领域之一。 前已报道了杨梅果核和国产甘薯叶中的黄酮类成分。 。箬竹叶黄酮类成分的研究未见报道 对于结构十分接近的黄酮类的分离 ，经典的薄层层析、柱层析均不能胜任，由于沸点高气相 包 谱分离也有困难 。故本文用 HPLC，通过优化 色谱条件 ，并采用二极管阵列检测技术 “，分析 箬竹叶中黄酮类成分取得 比较满意的结果。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 HP1050高效液相色谱仪，甲醇为光谱纯 ，水为超纯水，其他试剂 皆为分析纯 ，芦丁为生他 试剂 (含量≥95 )．箬竹叶产地为浙江临安地区 2．2 样 品处理 将竹叶低温 (OG)干燥后粉碎，取 150g竹叶粉，用石油醚抽提脱去色素与蜡质，待其 自然 干燥后，用 50 乙醇溶液提取 ，提取物浓缩至 50mL，经过 PVP(聚乙烯吡咯烷酮)填充柱 (g 精制的PVP填装 (16×80柱)充分吸附，用水洗去不吸附物再用 6o％DMF水溶液解吸 ，洗 脱液真空浓缩 ，用 甲醇溶解定容至 10mL，经过 0．5,um微孔膜过滤 ，滤液供色谱制备用，色谱 分析时将此滤液稀释 i00倍。 2．3 液相色谱条件 2．3．1 分析条件 色谱柱 ：(Waters)~-Bondapakphenyl 3．9×300mm(10 m)流动相 ：甲 醇 ／水 (30／70，V／V) 流速 ：1mL／min。柱温 ：20℃。进样量 5pL。检测波长 340nm 光谱采 集 ：190～600rim，记录纸速 1．0cm／m[n。 2．3．2 制备条件 色谱柱 ：SpheHsorbCH 8×300mm (10 m)(大连化物所 色谱 中 心) 流动相 ：甲醇 ／水 (15／85．V／V)。流速 ：3mL／mln。柱温：20C。进样量 100 L 检测波 长 340ilm 光谱采集：190～600rlm。记录纸速 0．1cm／mln。 捣 ：199507z1接受． 维普资讯 第 2期 邹耀洪 ：簪竹叶中黄酮类化合物 的高效蒗相色谱分析 2l7 2．4 收集与制备 根据保 留时间和信号响应值大小变化定时收集检测器 出 口的有关组份 ，并用 HPLC检验 收集液纯度 。收集液经真空旋转浓缩 ，即得黄酮类化台物的纯品。 3 结果与讨论 3．1 色谱条件的优化 HPLC分离黄酮甙类 ，常用 LichrosorbRP一18-甲醇 ／水 ／甲酸或 SpherisorbODsII一甲醇 ／ 水 ／乙酸 色谱系统 ，但试用效果均不够理想。考虑到黄酮类化台物中含有苯环结构 ，在苯基 柱上的容量因子较