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2017-11-29 发布于天津
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血液生化指标的测定试验五

实验五血液生化指标的测定一、葡萄糖(Glu)—GOD-POD法测定血糖一、实验目的（Experimental Objectives ） 1. 掌握利用分光分析技术测定血液中葡萄糖的基本原理和方法； 2. 了解血液中葡萄糖测定的临床意义。一、葡萄糖(Glu)—GOD-POD法测定血糖二二、、实验原理实验原理 (Experimental Principles)(Experimental Principles) 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶 GODGOD G 葡萄糖酸 + H+ H OO 22 22 PODPOD 氧化过氧化物酶过氧化物酶 HH O + OO + O 22 22 醌类化合物 4-氨基安替比林 + 酚偶联缩合（粉红色） (4-AAP) 在一定范围内在一定范围内，，红色醌类化合物红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比的生成量与葡萄糖含量成正比一、葡萄糖(Glu)—GOD-POD法测定血糖三三、、实验材料实验材料、、主要仪器和试剂主要仪器和试剂（（Equipments , Materials and ReagentsEquipments , Materials and Reagents ）） 1. R1(缓冲液) ：3 ×50ml ；成份：酚 5 mmol/L ，磷酸盐70 2. R2(酶试剂) ：2 ×50ml ；成份：GOD ＞10000 U/L ，POD ＞1000 U/L 4-AAP 0.4 mmol/L 标准液（5.55mmol/L ）：1 ×1ml 一、葡萄糖(Glu)—GOD-POD法测定血糖四四、、操作步骤操作步骤（（Operating ProcedureOperating Procedure ）） 1. 配制工作液: R1与R2等量混合，在 2-8℃可保存24小时。 2. 样品为空腹血清、血浆（肝素抗凝或EDTA抗凝），样品应在低温条件下运输保存。 3. 取三支试管，按下表操作加入物空白管（B）标准管（S）样品管（U）样本（μL） - - 15 标准液（μL） - 15 - 蒸馏水（μL） 15 - - 工作液（mL） 1.5 1.5 1.5 混匀，置37 ℃水浴15分钟，500nm波长，以空白管调 “零”点，测定各管吸光度（A ）值。一、葡萄糖(Glu)—GOD-POD法测定血糖四四、、操作步骤操作步骤（（Operating ProcedureOperating Procedure ）） 4. 计算： A U 葡萄糖（mmol/L） 标准溶液浓度 A