甘草黄酮对2型糖尿病大鼠骨骼肌中PPARγ蛋白的影响.pdf

· 3246 · 广东医学 2013年 11月 第34卷第 21期 GuangdongMedicalJournalNov．2013，Vo1．34，No．21 甘草黄酮对 2型糖尿病大 鼠骨骼肌中PPAR~／ 蛋 白的影响术 赵海燕，杨少娟 ，马永平，王彦芳 北方民族大学生物科学与工程学院(银川750021) 【摘要】 目的 研究甘草黄酮(LF)对实验性2型糖尿病大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPARy)表达 的影响，探索LF改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗的分子机制。方法 采用高脂高糖饲料喂养结合一次性小剂量腹腔 注射STZ的方法建立2型糖尿病实验大鼠模型。将实验大鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、甘草黄酮治疗组和 阳性对照组。分别以溶剂(1，2一丙二醇)、甘草黄酮 [300mg／(kg·d)]或吡格列酮 [10mg／(kg·d)]连续灌胃6 周。采用免疫印迹 (Westernblot)方法检测各组大鼠骨骼肌 中PPARy蛋 白的表达量。结果 糖尿病模型组骨骼 肌 中PPART蛋白的表达量较正常对照组降低 了45．06％(P0．01)。与糖尿病模型组相比，甘草黄酮治疗组和阳 性对照组骨骼肌中PPART蛋白的表达量分别提高了69．87％(P0．01)和71．00％(P0．01)。结论 甘草黄酮 能显著提高糖尿病大鼠骨骼肌中PPAR~蛋白的表达量，提示甘草黄酮改善胰岛素抵抗的部分原因可能与PPART 蛋 白表达的上调有关 。 【关键词】 甘草黄酮；2型糖尿病；胰岛素抵抗；PPARy；蛋白表达 PPAR属核受体家族成员，通过调节其靶基因转录 (SD)大 鼠由宁夏医科大学实验动物 中心提供，体重 活性发挥重要的生理功能。目前已发现 3种异构体， 180～220g。饲养于通风 良好，相对湿度为 50％ ～ 即 PPAR~、PPAR8和 PPART，其分布具有组织特异 70％，室温 18～22~C环境中，自由进食饮水 ，12h光照 性 J。其中PPART在脂肪组织、肝脏和肌肉组织中表 周期。普通饲料 (标粉25％，玉米粉 30％，豆粉 10％， 达，它通过对靶基因转录水平的调控 来调节葡萄糖 麸皮20％，鱼粉 10％，酵母粉 2％，食盐 1％，鱼肝油 稳态、脂类和脂蛋白代谢 、炎症和免疫反应以及脂肪细 1％，维生素添加剂0．5％，微量元素添加剂0．5％)与 胞分化 。PPAR~功能的变化可直接导致2型糖尿病 高脂高糖饲料 (普通饲料61％，猪油 10％，蔗糖20％， (T2DM)的发生 。用于治疗糖尿病的胰岛素增敏 蛋黄粉 8％，胆酸钠 1％)均 由北京科澳协力饲料有限 剂噻唑烷二酮 (thiazolidinediones，TZDs)类药物，如罗 公司提供。 格列酮、曲格列酮、吡格列酮均为 PPARy激动剂。。。 1．2 试剂 LF系以乙醇为提取剂从甘草 (Glycyrrhiza 它们虽然在治疗胰岛素抵抗方面取得了一定疗效 ，但 uralensisFischer)根中提取，并经柱层析进行纯化；盐酸 由于严重的不 良反应已被撤出市场或被限制使用。因 吡格列酮片购 自杭州中美华东制药有限公司；链脲佐 此 ，从中草药中寻找疗效显著、不 良反应小的 PPARy 菌素(STZ)购 自Sigma公司；碘 [I]胰岛素(INS)放射 激动剂作为抗糖尿病药物成为研究热点。已有研究 免疫分析试剂盒购 自北京科美东雅生物技术有 限公 表明，甘草黄酮 (LF)可抑制 KK—Ay小鼠的血糖升高 司；全蛋白提取试剂盒购 自南京凯基生物科技发展有 和腹部脂肪积累。它对高脂饮食诱导的肥胖 C57BL／ 限公司；BCAproteinassaykit购 自ThermoScientific公 6J小鼠的腹部脂肪积累和体重增加有明显的抑制作 司；兔抗大鼠PPAR~抗体、GAPDH抗体和辣根过氧化 用 ，同时可降低血清胰岛素和瘦素的含量 。LF还可 物酶标记的羊抗兔抗体购 自CellSignalingtechnology 显著降低 高胆 固醇 患者和 T2DM 大 鼠的三酰甘油 公司。其他试剂均为分析纯。 (TG)、总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋 白胆固醇 (LDL—