高糖条件下心脏成纤维细胞对心肌细胞肥大的影响-江苏大学.pdfVIP

第２４卷第３期 江 苏 大 学 学 报（医学 版） Ｖｏｌ．２４ Ｎｏ．３ 　 ２０１４年５月 　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃｉｎｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｙ２０１４ 　 　 　 　 　 　 高糖条件下心脏成纤维细胞对心肌细胞肥大的影响 赵龙，刘玲玲，李晓丽，周艳芳，王好，张赢予，孔彪，沈冬丽，张国辉 （江苏大学附属人民医院心内科，江苏 镇江２１２００２） ［摘要］　目的：研究高糖条件下心脏成纤维细胞对心肌细胞肥大的影响。方法：将体外分离培养的ＳＤ乳鼠心肌细 胞、心脏成纤维细胞随机分为心肌细胞低糖组（Ａ组），心肌细胞高糖组（Ｂ组），心肌细胞、心脏成纤维细胞共培养高 糖组（Ｃ组），心肌细胞、心脏成纤维细胞共培养加转化生长因子 （ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ，ＴＧＦ ）中和抗体高 β β β １ １ １ 糖组（Ｄ组），心脏成纤维细胞低糖组（Ｅ组），心脏成纤维细胞高糖组（Ｆ组）。培养０，６，１２，２４，４８，７２ｈ后，倒置显微 镜观察细胞形态、拍照并计算心肌细胞表面积，ＲＴＰＣＲ检测心肌细胞肥大标志物心房钠尿肽（ａｔｒｉａｌｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃｐｅｐ ｔｉｄｅ，ＡＮＰ）、肌球蛋白重链（ｍｙｏｓｉｎｈｅａｖｙｃｈａｉｎ，ＭＨＣ）ｍＲＮＡ表达水平，ＥＬＩＳＡ检测各组培养液中ＴＧＦ 表达 β β β β １ 量。结果：培养４８ｈ时，Ｂ组心肌细胞表面积比Ａ组显著增加（Ｐ＜０．０５），而Ｃ组在培养２４ｈ时心肌细胞表面积已 显著高于Ａ组（Ｐ＜０．０５）。ＲＴＰＣＲ显示Ｂ组和Ｄ组细胞在培养 １２ｈ时，ＡＮＰ、ＭＨＣｍＲＮＡ显著升高（Ｐ＜０．０５）， β 培养２４ｈ时达高峰；而Ｃ组在培养６ｈ时ＡＮＰ、ＭＨＣｍＲＮＡ即显著升高（Ｐ＜０．０５），培养１２ｈ时达高峰。ＥＬＩＳＡ检 β 测结果显示，培养１２ｈ起Ｂ组、Ｄ组ＴＧＦ 的表达均显著高于Ａ组（Ｐ＜０．０５），而在培养６ｈ时Ｃ组ＴＧＦ 的表达 β β １ １ 即已显著高于Ａ组（Ｐ＜０．０５）。Ｆ组各时间点成纤维细胞ＴＧＦ 的表达均高于Ｅ组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。 β １ 结论：心脏成纤维细胞在高糖条件下可能通过旁分泌ＴＧＦ 促进心肌细胞的肥大。 β １ ［关键词］