卡特兰aco基因克隆与反义表达载体的构建.pdfVIP

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2018-11-26 发布于天津
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卡特兰aco基因克隆与反义表达载体的构建.pdf

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卡特兰aco基因克隆与反义表达载体的构建

( ) 442 核农学报　2009 ,23 3 :442～446 　 J ournal of N uclear Agricultural Sciences ( ) 文章编号 2009 0344205 卡特兰 A CO 基因克隆与反义表达载体的构建 1 1 1 2 郑宝强　王　雁　彭镇华　李晓华 ( 1 国家林业局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所 ,北京　100091 ; 2 国家林业局竹藤科学与技术重点实验室国际竹藤网络中心 ,北京　100102) ( ) ( 摘　要 : 以卡特兰 Cattley a 花瓣为试材 , 提取其总 RNA , 并根据其他兰花的 ACC 氧化酶 1 aminocyclopropane1carboxylic acid oxidase , A CO) 基因保守序列设计了一对特异性引物 ,通过 RTPCR 法克隆得到 1 条 967bp 的卡特兰 A CO cDNA 片断 ,共编码 32 1 个氨基酸残基。序列分析结果显示该克隆片断与已发表的其他兰花的A CO 基因序列同源性很高 ,均在 85 % 以上 ,尤其与原生种和其近亲属的同源性在 95 % 以上。将克隆的卡特兰 A CO 片段反向连接到植物表达载体 pBI12 1 中 CaMV35S 启动子的下游 ,构建了卡特兰 A CO 基因的反义表达载体 pBI12 1ACC ,为进一步应用反义技术培养长花期卡特兰新品种奠定了基础 ,也首次为应用生物技术延长卡特兰花期做出了尝试。关键词 :卡特兰 ;ACC 氧化酶 ;反义表达载体 CLONING OF ACC OXIDASE GENE FROM Cattleya FLOWER AND CONSTRUCTION OF ITS PLANT ANTISENSE EXPRESSION VECTOR 1 1 1 2 ZHEN G Baoqiang 　WAN G Yan 　PEN G Zhenhua 　L I Xiaohua ( 1State Forestry A dministration ( S FA ) , Key L aboratory of Tree B reeding and CultivationResearch Instit