- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
安淮山羊骨骼肌卫星细胞的分离培养与鉴定-安徽农业大学学报
安徽农业大学学报, 2017, 44(2): 198-202
Journal of Anhui Agricultural University
[DOI] 10.13610/ki.1672-352x026 网络出版时间:2017/4/19 12:04:06
[URL] /kcms/detail/34.1162.S1204.052.html
安淮山羊骨骼肌卫星细胞的分离培养与鉴定
1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2,3*
郑 琪 ,睢梦华 ,朱 龙 ,吴 昊 ,丁建平 ,张运海 ,凌英会
(1. 安徽农业大学动物科技学院,合肥 230036 ;2. 安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室,合肥 230036 ;
3. 安徽省羊繁育工程技术研究中心,合肥 230036)
摘 要:为了分离得到安淮山羊骨骼肌卫星细胞,成功构建山羊骨骼肌卫星细胞系,为相关研究提供实验材料。
以安淮山羊背最长肌肌肉组织为材料,采取胶原酶和胰蛋白酶结合的二步消化法,结合差速贴壁法纯化原代骨骼肌
卫星细胞。对骨骼肌卫星细胞中特异性基因Pax7 用免疫荧光染色法及PCR 扩增加以鉴定。通过分离、纯化,得到
纯度较高的山羊骨骼肌卫星细胞,其形态为圆形,折光性强。培养一段时间后密度增大,细胞呈梭型。所得骨骼肌
卫星细胞生长状态良好,具有较为一致的生长方式和形态特点。经免疫荧光染色法以及PCR 鉴定发现细胞系中有
Pax7 基因的表达。通过上述材料和方法,可获得较纯的山羊骨骼肌卫星细胞,并稳定传代。
关键词:山羊;骨骼肌卫星细胞;细胞分离;体外培养;免疫荧光染色
中图分类号:S827.2 文献标识码:A 文章编号:1672352X (2017)02019805
Separation and identification of Anhuai goat skeletal muscle satellite cells
ZHENG Qi1,2, SUI Menghua1,2, ZHU Long1,2, WU Hao1,2, DING Jianping1,2, ZHANG Yunhai1,2, LING Yinghui1,2,3
(1. School of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036;
2. Local Animal Genetic Resources Conservation and Biobreeding Laboratory of Anhui Province, Hefei 230036;
3. Engineering Research Center of Reproduction and Breeding in Sheep of Anhui Province, Hefei 230036)
Abstract: The skeletal muscle satellite cells of Anhuai goat were isolated and used for construction of a se-
ries of experimental materials. The skeletal muscle satellite cells from longissimus muscle tissue of goats were
isolated by collagenase and trypsinase digestion method. The satellite cells were purified by differential adhesion
and cultured by passage, cryopreservation and other experimental methods. The marker gene of paired protein box
(Pax7) of the cells was detected by PCR and immunocytochem
文档评论(0)