南方根结线虫拮抗放线菌的分离、鉴定与杀线虫活性分析.pdf

2015（4）：41-45 中 国 蔬 菜 研究论文 CHINA VEGETABLES 南方根结线虫拮抗放线菌的分离、鉴定与 杀线虫活性分析 1，2 2 2，3 2 1 2 2* 陈井生 　朱　峰 　鲁旭鹏 　刘大伟 　刘德福 　段玉玺 　陈立杰 （黑龙江省农业科学院大庆分院，黑龙江大庆163316； 沈阳农业大学植物保护学院北方线虫研究所，辽1 2 宁沈阳110866；3 辽宁省植物保护站，辽宁沈阳110034） 摘　要 ：采用稀释分离法从连作大豆根际土壤中分离到1株放线菌H-2，对其进行了形态学特征、培养特征、生理生化特征 鉴定及16SrDNA分析，初步鉴定H-2菌株为小链霉菌（Streptomyces parvus ）。离体生物测定了小链霉菌H-2菌株发酵培养 滤液对南方根结线虫和小杆线虫的生物活性。结果表明：H-2菌具有较高的选择性杀线虫活性，对南方根结线虫2龄幼虫及 其卵囊的孵化具有较好的抑制作用，对土壤中自由生活的小杆线虫毒性微弱；H-2菌株代谢物5倍液处理24h后，对南方 根结线虫2龄幼虫的致死率达74.35%，卵囊孵化抑制率为78.46%，H-2菌株具有较高应用价值。 关键词 ：放线菌H-2；南方根结线虫；杀线虫活性；16SrDNA 根结线虫病是为害蔬菜生产的主要病害之一， 亟待解决的农业生产问题（乔丹娜等，2014；王 主要为害植株根部，在根部形成串球瘤状根结， 艳艳等，2014）。杀虫抗生素是一种重要的微生物 破坏根组织的分化和生理活动，影响地上部分生 杀虫剂，具有防效高、杀虫谱广、毒性相对较低、 长发育。近年来，由于保护地面积不断增加，使 对环境影响小等优点，逐渐成为研究的热点。放线 得蔬菜根结线虫病逐年加重，尤其以茄科、葫芦 菌是一种重要的微生物资源，也是很多用于防治病 科和十字花科等蔬菜受害最重。蔬菜根结线虫主 虫害的抗生素的主要来源，如井岗霉素、多效霉素 要包括南方根结线虫、北方根结线虫、花生根结 和南昌霉素等（Dicklowetal.，1993；陈立杰等， 线虫和爪哇根结线虫等4个常见种，其中以南方根 2008a）。阿维菌素是由除虫链霉菌（Streptomyces 结线虫（Meloidogyne incognita ）发病最为普遍。 avermectins ）产生的16元大环内酯抗生素，目前 南方根结线虫是番茄、黄瓜等蔬菜作物的病原线 生产中常用于防治植物线虫病害，但如果长期单一 虫，造成的产量损失一般为10%～30%，严重者高 施用易导致线虫产生抗性，因此需开发新型的杀线 达50%以上（刘维志，2000），且由于近年来番茄 虫抗生素进行轮换施用。本试验采用16SrDNA序 的栽培面积不断增加，加之重茬严重，使得番茄根 列分析结合常规分析方法，对分离获得的放线菌 结线虫病逐年加重。化学药剂至今仍是防治根结线 H-2菌株进行鉴定，并测定其对南方根结线虫的生 虫的主要手段，但因此造成的药剂残留对人体健康 物活性，以期为根结线虫防治提供新的生防因子。 极为不利，如何安全防治根结线虫已成为国际上 1　材料与方法 . 　试验材料 1 1 陈井生，男，博士研究生，助理研究员，专业方向：作物线虫病害控制， E-mail：jingsheng6673182@163.com H-2菌株是由沈阳农业大学北方线虫研究所从 *通讯作者（Correspondingauthor）：陈立杰，教授，博士生导师，专业方向： 黑龙江省哈尔滨市延寿县连作