色谱分析教案.doc

色谱分析教案 教学题目 第一章 色谱分析法概论（8学时） 教学目标 通过本章的学习，掌握色谱学原理，理解色谱学基础理论。了解色谱流出曲线和术语，掌握分离度的计算方法以及影响分离度的重要参数。 教学要求 掌握内容 1.色谱法的分类方法和基本术语；2.色谱分离的原理 熟悉内容 1.分配系数与保留行为的关系2.色谱分析法基本参数的定义及用途 了解内容 1.色谱法的用途及特点2.色谱法的分类和发展 教学重点 色谱分离的原理、 色谱法的基本术语、 教学难点 分配系数与保留行为的关系 对塔板理论和板高方程的理解 教学进程 第一节 色谱分析法概述 1学时 第二节 色谱过程和基本术语 3学时 第三节 色谱法的基本理论 4学时 教学手段注意内容 以教师课堂讲授为主，辅以提问、讨论等多种方式，引发学生积极思考，适当提问，以加深学生对某重点知识的印象。部分内容学生课后自学。 深化、拓宽 回顾以前学过的分离方法，引出色谱分离方法，使两者有机地联系起来 讲述塔板理论时与化工中精馏塔分离联系起来。深化塔板概念。 习题 见讲稿 参考资料 [1]《色谱学导论》武汉大学出版社； [2]《现代色谱分析》化学工业出版社； [3]《现代生物样品分离分析方法》 科学出版社。 第一节 色谱分析法概述 一、色谱法的定义及用途 1定义： 色谱分析法简称为色谱法或称层析法(chromatography)，是一种物理或物理化学的分离分析方法。其分离原理是利用物质在固定相和流动相中的分配系数不同，使混合物中的各组分离。 回顾一下以前学过的分离方法 沉淀法： 蒸馏法： 萃取法： 2色谱法的用途： 色谱法已广泛用于各个领域，成为多组分混合物的最重要的分离分析方法。因此，对于复杂的药物分析的，首选是色谱方法，在各国药典中都大量收载色谱法。现在色谱法形成一门专门的科学，广泛的用于各个领域，成为多组分混合物的最重要的分离分析方法。 二、色谱法的起源 创立： 1906 年，俄国植物学家Tsweet 发现色谱分离现象（植物色素分离见图示）。在碳酸钙上出现了具有不同颜色的色带，并将由此色带组成的谱图命名为“色谱图”。 现状：一种重要的分离、分析技术，分离混合物各组分并加以分析 固定相——除了固体，还可以是液体 流动相——液体或气体 色谱柱——各种材质和尺寸 被分离组分——不再仅局限于有色物质教学要求、方法及时间分配 三、 色谱法的特点 1 优点： “三高”、“一快”、“一广” 2 缺点： 四、色谱法的分类 按两相分子的聚集状态分类 按固定相的固定方式分类 3 按分离机制分类 色谱法简单分类： 五、色谱法的发展 1、历史 2、在我国的发展 3、展望 第二节 色谱过程和基本术语 一、色谱过程、分离原理及特点 ㈠色谱过程 ㈡色谱分离原理 ㈢色谱分离特点 1．不同组分通过色谱柱时的迁移速度不等→提供了分离的可能性 2．各组分沿柱子扩散分布→峰宽↑→不利于不同组分分离。 二、色谱流出曲线和有关概念 ㈠色谱流出曲线和色谱峰 1.流出曲线(色谱图)：电信号强度随时间变化曲线 2.基线：无样品时的电信号 （二）保留值：色谱定性参数 1. 保留时间tR： 2. 死时间tm(或t0)： 3.调整保留时间tR： 4.保留体积VR： 5.死体积Vm (或V0)： 6.调整保留体积VR： 7.相对保留值ris(选择性系数α)：调整保留值之比 （三）色谱峰高和峰面积 1.峰高h： 2.峰面积A： （四）色谱区域宽度： 标准差σ： 半峰宽W1/2： 峰宽W ： 三、分配系数与色谱分离 ㈠分配系数和容量因子：相平衡参数 1.分配系数K(平衡常数)： 2..容量因子k (容量比，分配比)： ㈡分配系数和容量因子与保留时间的关系 第三节 色谱基本原理 一、塔板理论 （一）、塔板理论的提出 （二）、塔板理论的假设 1、将塔分成若干小段，每段相当一块塔板，用n表示，在每块板上组分瞬间达到气液平衡。 2、所有组分开始时都处在柱中第零号塔板上。 3、流动相以脉冲形式进入，每个脉冲相当于一个塔板体积。 4、组分在所有板上线性吸附或分配，分配系数是一常数 （三）、理论板数的计算 n = 5.54 ( )2 n =16 ( )2 neff = 5.54 ( )2 neff = 16 ( )2 理论与有效的关系： neff = ( )2 n （四）、塔板理论的评价 二、速率理论 （一）、范氏方程的提出 （二）、速率理论的模型 组分分子在柱内的行为大致是：组分分子由载气携带向前走，而固定液分子将其回拉，由于载气分子的连续流动，逐渐释放，由于各组分与固定相分子作用力不同，在柱中滞留时