7.受体放射分析.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 二、受体标本的制备 在受体结合实验的研究中，所用的受体材料可以是组织切片，也可以是完整的单层培养细胞或游离活细胞，粗制的或纯化的细胞膜受体，可溶性的受体蛋白等。 （－）组织切片 冷冻组织切片常用明胶粘贴于玻片上，在温育缓冲液中与标记配基进行反应。反应后用缓冲液洗几次即可，切片厚度一般为5-50μm。用组织切片的目的更多是研究受体的分布（用放射自显影法或免疫组化法）。 （二）游离的完整细胞悬液 完整的活细胞可以是血细胞，培养的单层细胞，肿瘤的腹水型细胞以及经处理的原代细胞等。完整细胞的优点是在研究受体结合特性同时，能进行生物效应的测定。使用完整细胞的优点如下： 1、受体处于原有的正常环境中。膜未受扰乱，膜内pH、离子梯度也保存着。受体与其相连的效应系统（如G蛋白）也保存完好。 2、在受体功能反应完全的情况下研究受体，可以同时观察配基与受体结合的情况和细胞的生物效应。所得的结果更能反映受体的生理特点。 3、能直接给出平均每一个细胞的受体数。 但完整细胞的受体分析较难控制分析条件。操作过程可能导致细胞表面生理活性的改变，因此结果有时不够稳定。另外，