案例 酶的开法-溶菌酶.pptVIP

案例 酶的开发-溶菌酶 灰色链霉菌RX-17溶菌酶的研究 第一节灰色链霉菌RX-17溶菌酶的介绍 1、溶菌酶的发现 2、溶菌酶的分类 3、溶菌酶的作用机理 4、溶菌酶的研究现状 5、溶菌酶的应用领域 第二节灰色链霉菌RX-17溶菌酶初步研究 菌株的筛选→→菌株的鉴定→→产酶条件优化→→总溶菌体系性质的研究→→纯组分的分离纯化→→纯组分的性质研究→→酶的应用初步研究 一、菌株的筛选 1. 添加变链的双层平板 2. 初筛 3. 复筛 液体溶菌活性 平板溶菌活性 溶菌率的测定 对几种常见细菌的作用 RX-17生长与产酶曲线 二、菌株的鉴定 菌株的鉴定 1、形态特征 2、培养特征 3、生理生化特征 4、细胞壁成分分析 5、16SrRNA全序列分析 三、培养基组成和培养条件的优化 对碳源、氮源的正交实验：三因素三水平 最适配比：蔗糖3%，蛋白胨1.25%，酵母膏0.20% 最适培养条件的选择 最适培养时间----------72h 最适培养温度----------33℃ 培养基最佳初始pH------7.5 培养基最佳接种量------10% 摇瓶装液量------------小于10% 四、溶菌体系性质的研究 溶菌体系性质的研究--最适温度及热稳定性 溶菌体系性质的研究--最适作用离子强度 溶菌体系性质的研究--最适作用pH及pH稳定性 溶菌体系性质的研究--金属离子的影响 溶菌体系性质的研究--化学试剂的影响 EDTA ------------------------- - 螯合剂------------------------ - 巯基抑制剂-------------------- - 巯基化合物-------------------- + 羰基抑制剂-------------------- - 非离子表面活性剂-------------- ++ 离子型表面活性剂SDS----------- - 三氯乙酸---------------------- - 溶菌体系性质的研究--溶菌谱 五、 RX-17溶菌酶各组分的分离纯化及性质研究 第三节灰色链霉菌RX-17溶菌酶的分子生物学研究 Company Logo Company LOGO 第三节灰色链霉菌RX-17溶菌酶的分子生物学的研究 第二节灰色链霉菌RX-17溶菌酶初步研究 第一节 灰色链霉菌RX-17溶菌酶的介绍 Company Logo